[发明专利]一种蝴蝶樱的组织培养方法

说明书

一种蝴蝶樱的组织培养方法，所述培养方法包括以下步骤：外植体的消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗和移栽；本发明为解决上述不足提供一种蝴蝶樱的组织培养方法，使之樱花组织培养萌芽率高、增殖系数大、生根率好，培养周期短，且成活率高，有较好的市场前景、适宜推广。

技术领域

本发明涉及植物培养技术领域，具体涉及一种蝴蝶樱的组织培养方法。

背景技术

樱花，一般指的是蔷薇科李亚科樱属植物的花朵统称。樱花属木本，传统的繁殖方法主要是利用扦插、嫁接等繁殖方法，但这些繁殖方法一方面需要大量的母株，另方面还需花费大量人力、物力、财力、时间等，且繁殖系数低，成苗慢。随着樱花在城市和乡镇园林绿化建设中的广泛应用，需要大规模的苗木。因此，传统的繁殖方法已远远不能满足生产上的需要。

随着现代生物技术的发展，人们利用植物细胞的全能性，在人工控制的环境中，可以利用植物的茎尖、茎段、叶片等外植体诱导成小植株，这就是植物组织培养技术。植物组培苗具有根系发达，生长健壮，抗性增强，管理粗放，降低生产成本等特点。组织培养技术不仅具有繁殖系数大、成苗周期短的优点，而且能够保持亲本优良遗传性状的稳定性，为樱花快速繁殖和工业化生产提供了一条有效的途径。

近年来樱花的组培快繁技术日益受到人们的关注，并开展了广泛的研究，论文“日本晚樱组培快繁技术研究”中将晚樱进行组培快繁，增殖系数最高为2.31。现有技术樱花的组培快繁过程中：外植体萌芽率约为30～40％、增殖系数1～2.4、生根率不足50％，较低的成活率严重制约了樱花在城市绿化及园林建设中的应用。

目前，每当春天樱花盛开之季，各地樱花公园的游人如织，形成了独特的“赏樱游”并催生了“樱花经济”，据湖北省统计局报道，湖北省2013年首尝“花经济”硕果400亿，仅樱花一项就占全年旅游收入的20％，可见樱花在国内园林绿化中的地位十分重要，因此生产上迫切需要探讨出一种外植体萌芽率高、增殖系数大、生根率好的樱花快速繁殖技术，推动我国樱花产业化发展。

发明内容

本发明为解决上述不足提供一种蝴蝶樱的组织培养方法，使之樱花组织培养萌芽率高、增殖系数大、生根率好，培养周期短，且成活率高。

本发明的技术解决方案：

一种蝴蝶樱的组织培养方法，所述培养方法包括以下步骤：

(1)外植体的选择：选自蝴蝶樱花当年生、健壮无病虫害的嫩枝中上部位作为外植体，去掉叶片留叶柄，所述蝴蝶樱采自宿豫区运河湾农科院樱花园；

(2)外植体前处理：用洗手刷蘸洗衣粉轻轻刷洗茎段表面及腋芽处，经自来水冲洗干净，再切成2-3cm的小段，每段至少有一个侧芽，经自来水冲洗一遍；

(3)外植体的消毒：对植物材料进行前处理后，转入超净工作台进行消毒处理:通过70％的乙醇浸泡10s，然后用0.1％的升汞加吐温2滴约0.01ml浸泡，时间为6min，再用无菌水冲洗5遍；

(4)诱导培养：将上述外植体接入诱导培养基进行诱导培养，诱导培养基配比为：MS+2.0mg/L BA+0.2mg/L IBA+1.0g/L AC；

(5)增殖培养：之后选取生长一致、状况良好、紧密，带有绿色芽点的愈伤组织进行增殖培养，增殖培养基配比为：MS+2.5mg/L BA+0.05mg/L IBA+0.2mg/L NAA；

(6)生根培养：选择2-3cm高、生长健壮整齐一致的试管苗先在空白MS培养基上培养14d左右，以消除前期激素对生根试验的影响；在通过生根培养基进行生根培养，生根培养基配比为：1/2MS+0.5mg/L IBA+0.2mg/L NAA；