[发明专利]一种鬼鲉精子超低温冷冻保存方法

说明书

本发明公开了一种鬼鲉精子超低温冷冻保存方法，其中，超低温冷冻稀释液按照质量比，包括：NaCl,7.8‑8.2g/L；KCl,0.3‑0.5g/L；CaCl₂,0.1‑0.2g/L；NaHCO₃,0.3‑0.5g/L；KH₂PO₄,0.04‑0.08g/L；MgCl₂·6H₂O,0.08‑0.15g/L；MgSO₄·7H₂O,0.08‑0.12g/L；Na₂HPO₄·2H₂O,0.04‑0.08g/L；葡萄糖，8.0‑12.0g/L；pH＝6.70‑6.90。方法包括超低温冷冻稀释液和抗冻剂，按体积比，两者的体积比为8‑10:1混合成冷冻保存剂，鬼鲉精子和冷冻保存剂按体积比例1：2～3混合，进行液氮保存。本发明方法适用于长期保存鬼鲉精子。

技术领域

本发明属于海洋生物技术领域，为一种鬼鲉精子超低温冷冻保存的方法。

背景技术

鬼鲉为硬骨鱼纲、鲉形目Scorpaeniformes、鲉亚目Scorpaenoidei、毒鲉科Synanceiidae、鬼鲉属Inimicus鱼类的统称，俗称虎鱼。鬼鲉属鱼类为棘毒鱼中毒性较强的一类，广泛分布于中国沿海，是近海底层小型鱼类。其中日本鬼鲉肉质细嫩，肉味极其鲜美，烹调主要以汤炖为主，其汤有清凉解毒作用，可用于治疗疮疖肿，整鱼食用无任何毒性，鬼鲉已成为出口创汇的经济鱼类之一。近年来因过度捕捞，鬼鲉的野生资源急剧减少，急需开展资源保护和人工增养殖研究。本方法简单便捷，适于生产上作为种源，为保存野生鬼鲉和具有生长、抗病等优良性状的人工培育鬼鲉雄鱼精子，应用于选择育种而降低时间、空间的限制，并对鬼鲉种质资源的保护具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种鬼鲉精子超低温冷冻稀释液及保存方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

鬼鲉精子超低温冷冻稀释液，按照质量比，包括：

NaCl,7.8-8.2g/L；KCl,0.3-0.5g/L；CaCl₂,0.1-0.2g/L；NaHCO₃,0.3-0.5g/L；KH₂PO₄,0.04-0.08g/L；MgCl₂·6H₂O,0.08-0.15g/L；MgSO₄·7H₂O,0.08-0.12g/L；Na₂HPO₄·2H₂O,0.04-0.08g/L；葡萄糖，8.0-12.0g/L；pH＝6.70-6.90。

在本发明的优选实施例中，所述的一种鬼鲉精子超低温冷冻稀释液，按照质量比，包括：

NaCl,8.01g/L；KCl,0.40g/L；CaCl₂,0.14g/L；NaHCO₃,0.35g/L；KH₂PO₄,0.06g/L；MgCl₂·6H₂O,0.10g/L；MgSO₄·7H₂O,0.10g/L；Na₂HPO₄·2H₂O,0.06g/L；葡萄糖，10.00g/L；pH＝6.80。

本发明的又一技术方案为：

鬼鲉精子超低温冷冻保存剂，包括超低温冷冻稀释液和抗冻剂，按体积比，两者的体积比为8-10:1，其中，

1)超低温冷冻稀释液，按照质量比，包括：