[发明专利]一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法在审

专利信息
申请号: 201710022568.7 申请日: 2017-01-12
公开(公告)号: CN106810605A 公开(公告)日: 2017-06-09
发明(设计)人: 李国荣 申请(专利权)人: 苏州美极医疗科技有限公司
主分类号: C07K14/765 分类号: C07K14/765;C07K14/80;C07K14/805;C12N9/08;C07K1/14
代理公司: 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙)32256 代理人: 王锋
地址: 215000 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 密度 差别 纯化 药用 蛋白质 方法
【权利要求书】:

1.一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于包括:

(1)将含有药用蛋白质的待纯化样品与2M磷酸二氢钾水溶液或2M硫酸铵水溶液、异丁醇均匀混合,得到混合液体系;

(2)调节所述混合液体系的pH值为药用蛋白质的pI值±0.1;

(3)将调节pH值后的混合液体系倒入分离器中静置分层,分成上中下三层,收集中间层得到纯化后的药用蛋白质。

2.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:所述2M磷酸二氢钾水溶液或2M硫酸铵水溶液与异丁醇的体积用量比为5:2。

3.根据权利要求2所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于,步骤(1)包括:取1体积份的含有药用蛋白质的待纯化样品,加入5体积份的2M磷酸二氢钾水溶液和2体积份的异丁醇均匀混合,得到混合液体系。

4.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:所述待纯化样品包括牛全血、牛血浆、牛血清、牛乳清和牛奶中的任意一种或两种以上的组合。

5.根据权利要求1或4所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:所述药用蛋白质包括牛血清白蛋白、细胞色素C、辣根过氧化物酶、抗体和肌红蛋白中的任意一种或两种以上的组合。

6.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(1)中混合的方式包括在搅拌机中以500转/分钟~1000转/分钟的转速搅拌5分钟。

7.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(1)中混合的方式包括在离心机中以500转/分钟~1000转/分钟的转速离心5分钟。

8.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于,步骤(2)包括:用0.1M氢氧化钾水溶液调节所述混合液体系的pH值为5.5±0.1。

9.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(3)中静置的时间为5分钟。

10.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(1)~步骤(3)均在常温常压下进行。

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