[发明专利]一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法在审
申请号: | 201710022568.7 | 申请日: | 2017-01-12 |
公开(公告)号: | CN106810605A | 公开(公告)日: | 2017-06-09 |
发明(设计)人: | 李国荣 | 申请(专利权)人: | 苏州美极医疗科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/765 | 分类号: | C07K14/765;C07K14/80;C07K14/805;C12N9/08;C07K1/14 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙)32256 | 代理人: | 王锋 |
地址: | 215000 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 密度 差别 纯化 药用 蛋白质 方法 | ||
1.一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于包括:
(1)将含有药用蛋白质的待纯化样品与2M磷酸二氢钾水溶液或2M硫酸铵水溶液、异丁醇均匀混合,得到混合液体系;
(2)调节所述混合液体系的pH值为药用蛋白质的pI值±0.1;
(3)将调节pH值后的混合液体系倒入分离器中静置分层,分成上中下三层,收集中间层得到纯化后的药用蛋白质。
2.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:所述2M磷酸二氢钾水溶液或2M硫酸铵水溶液与异丁醇的体积用量比为5:2。
3.根据权利要求2所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于,步骤(1)包括:取1体积份的含有药用蛋白质的待纯化样品,加入5体积份的2M磷酸二氢钾水溶液和2体积份的异丁醇均匀混合,得到混合液体系。
4.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:所述待纯化样品包括牛全血、牛血浆、牛血清、牛乳清和牛奶中的任意一种或两种以上的组合。
5.根据权利要求1或4所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:所述药用蛋白质包括牛血清白蛋白、细胞色素C、辣根过氧化物酶、抗体和肌红蛋白中的任意一种或两种以上的组合。
6.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(1)中混合的方式包括在搅拌机中以500转/分钟~1000转/分钟的转速搅拌5分钟。
7.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(1)中混合的方式包括在离心机中以500转/分钟~1000转/分钟的转速离心5分钟。
8.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于,步骤(2)包括:用0.1M氢氧化钾水溶液调节所述混合液体系的pH值为5.5±0.1。
9.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(3)中静置的时间为5分钟。
10.根据权利要求1所述的一种密度差别法纯化药用蛋白质的方法,其特征在于:步骤(1)~步骤(3)均在常温常压下进行。
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