[发明专利]一种用于检测UO22+的液晶生物传感方法

权利要求书

1.一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：首先在传感基底表面修饰TEA/DMOAP混合自组装膜，将捕获探针固定于经过化学敏感膜修饰的下玻片基底表面，然后滴加UO₂²⁺与DNA酶双链复合物反应的混合溶液，将修饰有DMOAP敏感膜的上玻片和修饰TEA/DMOAP混合敏感膜且接有DNA的下玻片面对面组装制成液晶盒，用偏光显微镜观察光学信号响应。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)玻片基底的预处理；

(2)玻片基底敏感膜的组装；

(3)捕获探针的固定；

(4)铀酶链和底物链进行杂交反应；

(5)液晶盒的制备；

(6)用偏光显微镜观察并采集图片、分析结果。

3.根据权利要求2所述的一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：步骤(1)具体为将载玻片用钢化玻璃刀切成大小约为1.5cm×2cm的方块，置于培养皿中，用新鲜配制的体积比为6：3～8：3的浓硫酸与双氧水的Piranha溶液在恒温槽中浸泡，然后用超纯水冲洗，在无水乙醇中浸泡，氮气吹干，放置于烘箱中加热干燥，取出防尘备用。

4.根据权利要求2所述的一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：步骤(2)具体为：

(a)、上玻片组装：将Piranha处理过的玻片浸泡在体积分数为0.2％～0.6％的DMOAP水溶液中，室温放置10min，然后取出用超纯水冲洗干净，氮气吹干后置于烘箱中加热干燥；

(b)、下玻片组装：将Piranha处理过的玻片浸泡在TEA和DMOAP的乙醇混合溶液中，恒温浸泡后依次用乙醇、超纯水冲洗干净，氮气吹干，置于烘箱中加热干燥。

5.根据权利要求2所述的一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：步骤(3)具体为将捕获探针滴加到经过化学敏感膜修饰的下玻片基底表面，37℃恒温反应1～3h，然后依次用1×SSC洗液、超纯水冲洗，氮气吹干。

6.根据权利要求2所述的一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：步骤(4)具体为在pH 5.5的MES缓冲液中将DNA酶链和等量的底物链充分混合，在水浴锅中加热到75～90℃退火2～5min，然后冷却到室温，得到DNA酶双链复合物，然后加入不同浓度的UO₂²⁺，混合均匀后于室温下反应，将上述溶液滴加到固定有捕获探针的下玻片上，37℃反应1～3h，然后依次用1×SSC洗液、超纯水冲洗，氮气吹干。

7.根据权利要求2所述的一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：步骤(5)具体为将步骤(4)得到的接有目标物的下玻片与上玻片面对面组装，中间用一边缘开有小口的厚度约为20μm的凸型Mylar聚酯片隔开，除开有小孔方向的其他三边用长尾夹固定，将其放置于自制的密闭加热装置中，加热至40℃使液晶分子成各向同性的液态，通过开有小口的玻片边缘处移取5～10μL的5CB液晶注入液晶盒，然后冷却到室温。

8.根据权利要求5所述的一种用于检测UO₂²⁺的液晶生物传感方法，其特征在于：1×SSC洗液由6×SSC储备洗液稀释得到；6×SSC储备洗液为0.9mol/L NaCl、0.09mol/L二水合柠檬酸三钠、质量分数0.01％十二烷基硫酸钠的混合溶液。