[发明专利]一种用于油脂降解的微生物菌剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于应用生物技术领域，特别是涉环境微生物技术领域。

背景技术

现代工业化发展的同时加剧了环境污染,石油的开采及石油化工企业的生产经营活动都造成了企业周边土壤及河流大量的油脂污染。另一方面随着人们生活水平的提高餐厨垃的量也逐渐增多。餐厨垃圾中存在大量的油脂，油脂的存在给餐厨垃圾的处理带来了巨大的困难。通常情况下一般的微生物在高浓度的油脂中是不能生长繁殖的，油脂不能通过普通微生物降解，这给餐厨垃圾生物处理处理及石油污染土壤及水体修复造成了巨大的障碍。如何从被油脂类污染的土壤中筛选出高效降解油脂的微生物已经成为当前环境污染治理的热点研究课题。

发明内容

为了克服上述普通环境类微生物不能降解油脂的不足，本发明提供了（一种用于油脂降解的微生物菌剂及其制备方法）。该方法从被油脂污染的环境中分离到两组能够高效降解油脂的真菌，经16SDNA鉴定这两株菌分别为中华米根霉及产枝木霉，这两株菌中任一单菌对油脂的降解效率极高，在48h内对橄榄油的降解率分别能够达到63%及68%，经过测试这两种菌在一定的程度上都能够产脂肪酶。将这两种菌在按照一定的比例组合，这两种菌对油脂的降解能够起到很好的协同作用，在48h内对橄榄油的降解率能够达到75%以上。

本发明所采用的技术方案是：用于油脂降解的微生物菌剂及其制备方法其特征在于，该预处理微生物菌剂的各组分微生物在微生物菌剂总质量中的质量百分比为：中华米根霉20-70分量，长枝木霉30-80分量的比例组合。所述的用于油脂降解的微生物菌剂，其特征在于：该菌剂的有效活菌数在6×10⁸-7×10⁹CFU，且每种单菌的活菌数量不小于1×10⁸ CFU。脂肪酶酶活在20-50u/g。

所述的用于油脂降解的微生物菌剂及其制备方法，其特征在于该方法是将各组分微生物分别进行固态发酵培养后再按照一定的比列进行复配从而得到高效降解油脂的微生物菌剂。

所述的用于油脂降解的微生物菌剂及其制备方法，其特征在于它包括如下的步骤：

a：一级种子的制备：分别将中华米根霉及长枝木霉菌种接种于PDA培养于100-400rpm，28-45℃的条件下，培养2-3天，待种子成熟备用

b：二级种子的制备：将活化好的一级种子，按照10%-20%的接种量接种到液体发酵罐中发酵，发酵条件控制为：温度28-45℃，通气量控制为0.5-2L/min，搅拌转速300-500rpm，装料系数控制为75%，发酵3-5天，制备得到二级种子待用

c：固体发酵生产：分别将中华米根霉及长枝木霉二级种子接种于固体培养基中进行固体发酵，控制固体培养基水分在50-80%，培养温度在28-40℃，培养4-6天制备得到中华米根霉及长枝木霉单一菌剂。

d：菌剂复合：将中华米根霉及长枝木霉按照质量百分比为：中华米根霉30-70%、长枝木霉70-30%比例进行混合制备得到用于餐厨垃圾油脂降解的微生物菌剂。

步骤b中二级种子所用的培养基组成为：2-5%的麸皮，1-2%的葡萄糖，其余为水。步骤c中固体培养基为麸皮：米糠为4:6-7:3，豆粕2-5%,葡萄糖1-3%。

本发明有益效果：

与现有技术相比，本发明的有益效果是制备得到的高效油脂降解菌剂其工艺技术及产品具有如下的一些特点：

1)工艺采用了液态发酵与固态发酵相结合的工艺，液态条件下制备发酵种子，固态工艺条件下制备得到最终的成品，具有工艺简单，设备投资费用低，生产成本低，没有大量的废水产生。

2)菌剂具有有效活菌数量高，每克产品有效活菌最高可达6×10⁸-7×10⁹CFU,处理相同量的物料可以减少菌剂的投加量从而大大的减小了运行成本。

3）所使用菌种分别从被油脂污染的环境中筛选,产品的适用能力强,能够适应各类油脂污染的场所。

4）菌种的生长速度快，除臭效率高，能够在48h内起到对油污的明显降解作用，从而对环境起到高效的修复作用

本发明所选用的菌种特性及功能如下：

1)中华米根霉：该菌不仅能够利用油脂，而且在一定的条件下还能够产生大量的淀粉酶及糖化酶类，糖化酶的酶活可高达2000u/g

2）长枝木霉：该菌除了能够产生脂肪酶外，其本身还具有高产纤维素酶的特性，在一定的条件下该菌所产的纤维素酶酶活可高达200u/g，对纤维素类物质可以起到快速降解的能力