[发明专利]一种金属离子强化嗜热溶胞菌用于抗生素菌渣减量化的方法有效

专利信息
申请号: 201710027760.5 申请日: 2017-01-16
公开(公告)号: CN106694521B 公开(公告)日: 2018-09-11
发明(设计)人: 李再兴;钟为章;李贵霞;王蕊;王贺飞;陈佳奇 申请(专利权)人: 河北科技大学
主分类号: B09B3/00 分类号: B09B3/00
代理公司: 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 代理人: 周淑歌
地址: 050000 *** 国省代码: 河北;13
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摘要:
搜索关键词: 一种 金属 离子 强化 嗜热溶胞菌 用于 抗生素 菌渣减 量化 方法
【权利要求书】:

1.一种金属离子强化嗜热溶胞菌用于抗生素菌渣减量化的方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)嗜热溶胞菌活化

以液体培养基为试验活化嗜热溶胞菌所用的培养基,取嗜热溶胞菌按体积比6-12%接种于液体培养基中,置于55-65℃、110-130 r/min条件下的恒温摇床中恒温培养66-80 h,将菌液取出后稀释100-1000000倍,得稀释液,在无菌条件下将稀释液滴于固体培养基中,进行平板涂布分离,将涂布后的平板倒置于55-65℃恒温培养箱中静置培养20-28h,微生物在固体培养基上会形成单个菌落,根据菌落的形态特征,在固体培养基上划线分离纯化,得到单菌,将分离后得到的单菌菌株在2-6℃冰箱中保存,备用;

(2)金属离子强化嗜热溶胞菌对菌渣减量化处理

将步骤(1)中冷藏的单菌接种到液体培养基中活化20-28 h得嗜热溶胞菌菌液,在离心管中加入抗生素菌渣后,加入体积比为6-12%的OD600nm为0.6-0.8的嗜热溶胞菌菌液,加入金属离子溶液,将有机负荷和pH值分别调节至0.8-1.2 kgCOD/(m3·d)和6.8-7.2,然后将其均置于温度55-65℃,转速110-130 r/min恒温摇床中进行强化减量化处理,处理时间为1-48h;

所述金属离子为钾离子、钠离子或钙离子。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述液体培养基组成为:牛肉膏5.0 g,蛋白胨10.0 g,NaCl 5.0 g,水1000 mL,pH=7.0,121℃条件下灭菌20 min;固体培养基为在液体培养基中加入质量比为2%的琼脂。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述金属离子的浓度为100-400μmol·L-1

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述抗生素菌渣包括但不限于头孢菌素菌渣、土霉素菌渣、红霉素菌渣和青霉素菌渣。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中嗜热溶胞菌按体积比10%接种于液体培养基中,置于60℃、120 r/min条件下的恒温摇床中恒温培养72 h。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中稀释液在固体培养基中的培养温度为60℃,培养时间为24 h。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中有机负荷和pH值分别调节至1.0kgCOD/(m3·d)和7.0,将其均置于温度60℃,转速120 r/min恒温摇床中进行强化减量化处理。

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