[发明专利]多肽及其制备方法和应用、药物组合物

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种多肽及其制备方法和应用、药物组合物。该多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1：ETIRKAYPDANLVNDRVLR。其制备方法包括：合成编码该多肽的基因序列，并将所述基因序列转入pPIC9K质粒中，得重组质粒；用大肠杆菌DH5α扩增所述重组质粒，然后提取所述重组质粒；将提取的所述重组质粒转入大肠杆菌BL21中进行基因表达，并提取所述多肽。该多肽可竞争性抑制Cyclin E蛋白活性，对治疗人甲状腺乳头状瘤具有很好的疗效，能用于制备甲状腺乳头状瘤药物，为Cyclin E蛋白抑制剂多肽药物治疗人甲状腺乳头状瘤提供了更好的选择。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种多肽及其制备方法和应用、药物组合物。

背景技术

甲状腺癌是内分泌系统领域中常见的恶性肿瘤，其发病率在头颈部恶性肿瘤中居首位，甲状腺乳头状癌(PTC)的发病率约占所有甲状腺癌发病类型的80％，任何年龄均可发病，多见于儿童或中青年女性。甲状腺癌的发病机制以及发病率急剧增加的原因尚不明确，其早期无明显症状，目前治疗以手术清除为主，虽然该方法可以不同程度地提高PTC患者的CR率，但仍然不能抑制肿瘤的复发。靶向治疗是针对肿瘤发生过程中阻断某个或多个信号通路，达到治疗肿瘤的目的，生物靶向治疗肿瘤是非常有前景的治疗方法。

Cyclin蛋白可控制细胞的休息、生长和分裂的周期。其中，Cyclin E是控制细胞生长周期的靶点；Cyclin E可以参与并控制细胞何时开始生成DNA，并为细胞分裂形成新细胞做准备。研究表明，Cyclin E与CDK2结合，使后者表现激酶活性。CyclinE-CDK2激酶通过催化下游p107蛋白磷酸化，磷酸化后的p107蛋白失去对E2F的抑制作用，E2F促进细胞复制有关基因转录，细胞由G1期向S期转化，使细胞分裂顺利进行。在许多不同类型的肿瘤中，Cyclin E异常高表达，刺激细胞过快分裂形成肿瘤。因此，通过阻断Cyclin E蛋白与CDK2的结合可抑制肿瘤细胞的DNA复制有关的基因转录，进而阻止肿瘤细胞的扩增。研究发现，在果蝇胚胎发育过程中，如果将Cyclin E进行基因突变，该胚胎的细胞则被阻止在G1期；将抗Cyclin E的特异性抗体作细胞显微注射，被注射的细胞停留在G1期。

综上，可将Cyclin E作为治疗人甲状腺乳头状癌的新靶点进行研究。但是，目前尚未有开发成熟的利用Cyclin E蛋白抑制剂多肽治疗人甲状腺乳头状癌的药物。

发明内容

本发明的目的克服现有技术的上述不足，提供一种多肽及其制备方法和应用、药物组合物，旨在解决现有临床中无Cyclin E蛋白抑制剂多肽治疗人甲状腺乳头状癌的药物的空缺。

为实现本发明的上述目的，所采用的技术方案如下：

一方面，本发明提供一种多肽，所述多肽为Cyclin E蛋白抑制多肽，且所述CyclinE蛋白抑制多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1：ETIRKAYPDANLVNDRVLR。

本发明提供的全新多肽，可竞争性抑制Cyclin E蛋白活性，对治疗人甲状腺乳头状瘤具有很好的疗效，为Cyclin E蛋白抑制剂多肽药物治疗人甲状腺乳头状瘤提供了更好的选择。

另一方面，本发明还提供一种制备上述多肽的方法。所述方法包括如下步骤：

合成编码上述多肽的基因序列，并将所述基因序列转入pPIC9K质粒中，得重组质粒；

用大肠杆菌DH5α扩增所述重组质粒，然后提取所述重组质粒；

将提取的所述重组质粒转入大肠杆菌BL21中进行基因表达，并提取所述多肽。

本发明提供的上述多肽制备方法，简单易操作，成本低，且可获得高浓度的多肽，有效保持多肽的活性，有益于对后续对该多肽药物的开发研究。

相应地，本发明还提供一种上述多肽在制备甲状腺乳头状瘤药物中的应用。