[发明专利]单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法

权利要求书

1.一种单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)收集稻谷种子

收集单粒稻谷种子，将其放置干燥器中过夜；

(2)NIR光谱采集

将种子、种壳和去除种壳的糙米分别放置于NIR透射光谱仪的NIR透射光谱测量载物台上进行光谱采集；其中NIR透射光谱测量载物台为自制的适用于单粒稻谷种子的NIR透射光谱测量载物台；

(3)单粒糙米粗蛋白含量的测定

对糙米进行压碎、过筛处理，再于烘箱中烘干，最后采用杜马斯法测定单粒糙米粗蛋白的含量；

(4)光谱分析和定量模型的建立

对比步骤(2)中获取的种子、种壳和糙米的透射光谱，找出种壳吸光值较低而糙米吸光值变化较明显的波数范围后选择最佳波数范围，再于不同的光谱预处理方法下，结合步骤(3)中所得单粒糙米粗蛋白的含量，建立单粒稻谷种子粗蛋白的定量分析模型。

2.根据权利要求1所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述步骤(1)中单粒稻谷种子为来源相同且质量变化范围为27.6-41mg的单粒稻谷种子。

3.根据权利要求1所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述步骤(2)中采用傅里叶近红外光谱仪进行光谱采集，波数范围为5800-12500cm^-1。

4.根据权利要求1所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述步骤(3)中单粒糙米粗蛋白含量的测定的具体方法为：将糙米压碎，过95-105目筛，于75-85℃烘箱过夜烘干，再秤取糙米粉4-6mg，采用元素分析仪测定其含氮量，再乘以糙米粉蛋白质的换算系数5.95获得其粗蛋白含量。

5.根据权利要求4所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述元素分析仪中氧化炉温度设置为1100-1200℃，还原炉设置为800-900℃，通氧时间为85-95s，仪器测定的标准品为苯磺酸。

6.根据权利要求1所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述步骤(4)中种壳吸光值较低而糙米吸光值变化较明显的波数范围为7450-12500cm^-1，最佳波数范围为7450-9110cm^-1；最佳波数范围的选择方式为：根据光谱信息和回归方程公式Y＝bX+a，得到7450-12500cm^-1波数范围内蛋白的回归系数曲线，再根据回归曲线去除噪音较大的波数范围。

7.根据权利要求1所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述步骤(4)中采用软件Unscramble 9.7进行模型的建立。

8.根据权利要求1所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述步骤(4)中不同的光谱预处理方法分别为标准正态变化光谱预处理、多元散射校正光谱预处理、一阶导数光谱预处理和二阶导数光谱预处理。

9.根据权利要求1所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述步骤(2)中NIR透射光谱测量载物台包括光谱测量载物台；所述光谱测量载物台的上表面开有第一凹槽，第一凹槽内还设有带有透光孔的第二凹槽；

所述光谱测量载物台为一开口向下的圆柱形载物台，圆柱形载物台的顶面中心位置开有长方形的第一凹槽；所述第二凹槽位于第一凹槽底部的中心位置，为半椭圆形凹槽，透光孔位于第二凹槽底部的中心位置，为圆形且垂直贯穿于整个光谱测量载物台的透光孔。

10.根据权利要求9所述的单粒稻谷种子的蛋白质定量分析NIR透射光谱测量方法，其特征在于，所述光谱测量载物台的高度为9.5mm，厚度为4.5mm；所述光谱测量载物台顶面的圆直径为22.5mm，高度为4.5mm；所述第一凹槽的长度为13mm，宽度为5mm，深度为2.5mm；所述第二凹槽长轴直径为5mm，短轴直径为2mm，与单粒稻谷种子相配合；所述透光孔的直径为1.6mm，小于单粒稻谷种子的宽度。