[发明专利]一种开花植物花粉特异性表达DCP2启动子有效
申请号: | 201710031007.3 | 申请日: | 2017-01-17 |
公开(公告)号: | CN106834289B | 公开(公告)日: | 2019-09-13 |
发明(设计)人: | 张秀春;吴坤鑫;刘志昕;张家明 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/02;A01H6/20 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 时立新 |
地址: | 571101 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 开花 植物 花粉 特异性 表达 dcp2 启动子 | ||
1.一种开花植物花粉特异性表达DCP2启动子,其特征在于,该启动子碱基序列如SEQID No.1所示。
2.权利要求1所述开花植物花粉特异性表达DCP2启动子在拟南芥中的应用,其特征在于,用于在花粉粒中特异性表达目的基因,或者通过调控花粉产生或生存能力的基因表达而导致雄性不育。
3.如权利要求2所述开花植物花粉特异性表达DCP2启动子在拟南芥中的应用,其特征在于,所述目的基因为GUS基因;所述调控花粉产生或生存能力的基因具体为:登录号分别为AJ344210.1的
4.利用权利要求1所述DCP2启动子所构建的一种拟南芥开花期花粉特异性表达载体pDCP2-GUS。
5.权利要求4所述拟南芥开花期花粉特异性表达载体pDCP2-GUS的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
(1)将DCP2启动子与pMD18-T载体进行连接,构建pMD18-DCP2;
(2)将pMD18-DCP2质粒与质粒pBAR-GUS分别进行AgeI及SpeI双酶切,分别回收酶切产物,并将酶切产物进行连接;
(3)将步骤(2)中连接产物转化大肠杆菌感受态细胞进行抗性筛选,获得重组载体pDCP2-GUS。
6.利用权利要求4所述拟南芥开花期花粉特异性表达载体pDCP2-GUS的转基因拟南芥培育方法,其特征在于,将花粉特异性表达载体pDCP2-GUS转化农杆菌后,采用农杆菌介导的花粉管渗透法对野生型拟南芥受体进行转化,利用除草剂进行抗性筛选,最终可获得转基因拟南芥。
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