[发明专利]N-(4-取代苯乙基)乙酰胺类化合物及其用途

说明书

本发明涉及乙酰胺类化合物及其用途。本发明公开了一类结构新颖的N‑(4‑取代苯乙基)酰胺类化合物。通过体外活性测试实验表明该类化合物对半胱氨酸蛋白酶(FP‑2)和二氢叶酸还原酶(DHFR)具有酶抑制活性。并且经体外杀疟实验结果表明：该类化合物对野生、耐药疟原虫都具有抑制作用。

技术领域

本发明涉及乙酰胺类化合物及其用途，特别涉及一类N-(4-取代苯乙基)乙酰胺类化合物及其用途。

背景技术

疟疾是世界上最严重的流行病之一。有100多个国家和地区的大约30亿人口受到疟疾的威胁，全球每年患疟疾的人有3.5～5亿，每年死于疟疾的患者为150～270万，其中约一半为儿童，90％的病例发生在非洲和亚洲的贫困国家。在我国流行疟区主要包括海南和云南等19个省市，自治区，约数百万人发病。虽然目前已存在有效的抗疟疾药物，但疟疾患者的死亡率逐年上升，主要原因是疟原虫对有限的抗疟药适应很快，产生了严重的抗药性。

疟疾防治在很大程度上还依赖于化学药物的预防和治疗。近70多年来，只有少数药物适用于临床，而抗药性疟原虫株日渐增多。随着生物化学、分子生物学和分子药理学等相关学科的不断发展，揭示了许多酶和受体在生物体内的生物化学过程中的作用，以在生物体内起关键性作用的酶，作为药物作用靶点进行新药设计已经成为新药研究开发的发展趋势。新型抗疟原虫药物的设计是以一种在疟原虫生命周期中起重要作用的半胱氨酸蛋白酶(falcipain)为靶点，推动这个发展过程的是人们对木瓜蛋白酶半胱氨酸蛋白酶这个药物靶标认识的不断深入。疟原虫通过消化红细胞，作为主要的氨基酸来源用于自身的蛋白质合成。已知在血红蛋白的降解过程中，有三种疟原虫蛋白酶起重要的作用。其中Plasmepain I和II属天门冬氨酸蛋白酶，falcipain属半胱氨酸蛋白酶。天门冬氨酸蛋白酶抑制剂主要作用于分瓣原虫和红细胞破裂；半胱氨酸蛋白酶抑制剂主要作用于原虫营养体，特异性地作用于疟原虫生命周期中红细胞降解的第一步，使疟原虫因缺少合成自身蛋白的自由氨基酸而死亡。而临床上广泛应用的抗疟药氯喹则通过抑制游离血红素的聚合，使疟原虫被游离原血红素释放的大量游离基杀死。

显然半胱氨酸蛋白酶抑制剂杀死疟原虫的机制和氯喹不同。因此选择半胱氨酸蛋白酶作为抗疟新药研究的靶点，可望克服抗疟药物的耐药性问题。半胱氨酸蛋白酶是Mr约为21,000～30,000的蛋白质，在pH 4～6.5时具有最高水解活性，它的活性部位具有半胱氨酸残基，原虫的半胱氨酸蛋白酶属于木瓜蛋白酶家族。已知的疟原虫半胱氨酸蛋白酶有四个亚型，falcipain-1，falcipain-2A，falcipain-2B，falcipain-3。falcipain 1是第一个表达得到的疟原虫半胱氨酸蛋白酶，其生物学研究表明，它对疟原虫的无性生殖阶段并无影响，但能显著的影响卵囊的功能。falcipain-2A，falcipain-2B具有97％的同源性，氨基酸序列的7位有所不同。通过寡核苷酸探针的监测发现，falcipain-2B mRNA的表达水平比falcipain-2A低。然而falcipain-2A和falcipain-2B在疟原虫营养体晚期其表达的时间依赖性和峰值极为相似，这表明两种不同的亚型具有相似的生物学功能。falcipain-3与falcipain-2在催化域有66.6％的同源性，但是它们表达的阶段有所不同。falcipain-2在营养体阶段表达达到最高峰，而falcipain-3在更为成熟的疟原虫阶段表达达到高峰。falcipain-3的晶体结构还未见报道。在这几种亚型中falcipain-2的研究最多，因此其抑制剂的开发亦受到更为广泛的关注。除了对半胱氨酸蛋白酶falcipain-2有抑制作用，对二氢叶酸还原酶(dihydrofolatere ductase，DHFR)也有抑制作用。