[发明专利]日本漆树高效快速扩繁方法

权利要求书

1.一种日本漆树高效快速扩繁方法，其特征在于按下列步骤实施：

（1）外植体的选择与消毒：选取优良日本漆树单株的当年生嫩茎或根萌幼苗，去除叶柄和叶片，除去表面杂质，用2%的洁儿灭溶液浸泡10分钟，净水冲洗2小时，剪成3-4cm长含1-2个腋芽的茎段，75%乙醇浸泡10秒，用1%洁儿灭浸泡1分钟，无菌蒸馏水冲洗2-3次后，用0.1%升汞浸泡5分钟，无菌蒸馏水冲洗5-8次，吸干外植体表的残留水分；

（2）启动培养：将茎段两端分别切去2-4mm，平放在启动培养基上，腋芽朝上，启动培养基的配方为： MS+ 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.5mg/L+100mg/L半胱氨酸，30g/L蔗糖，4.5g/L琼脂，pH为5.8-6.0，置于昼温25±2℃，夜温20±2℃的条件下培养15-20天后，腋芽处长出1-2cm高腋芽，再置于光照强度1000-2000Lux，光照时间12小时/天，昼温25±2℃，夜温20±2℃的条件下光照培养10-15天；

（3）不定芽诱导：待腋芽长到2-3cm高时，将其从老茎上剪下，去掉底部1-2个叶片，直立于不定芽诱导培养基上，不定芽诱导培养基MS + ZT0.1mg/L + 6-BA0.5mg/L，30g/L蔗糖，4.5g/L琼脂，pH为5.8-6.0，置于昼温25±2℃，夜温20±2℃的条件下培养15-20天；

（4）增殖培养：从基部切取含1-2个腋芽的茎段，并平放于增殖培养基上，增殖培养基的配方为：MS + ZT0.5mg/L + 6-BA1.0mg/L +TDZ0.1mg/L，30g/L蔗糖，4.5g/L琼脂，pH为5.8-6.0；置于昼温25±2℃，夜温20±2℃的条件培养15-20天后，腋芽基部形成2cm³的愈伤组织，同时腋芽长到3-4cm；待15天后，待不定芽小苗长到3-4cm高，再将小苗切下，转到相同的增殖培养基上，经过45天的培养，诱导出的小苗又长到3-4cm，反复将高3-4cm的小苗切下进行增殖培养；

（5）壮苗培养：茎段腋芽处长出1-2cm高腋芽，形态学下端也形成1cm³的愈伤组织，壮苗培养基的配方为：MS + TDZ0.2mg/L+NAA0.1mg/L，30g/L蔗糖，4.5g/L琼脂，pH为5.8-6.0；置于昼温25±2℃，夜温20±2℃的条件培养15-20天，再置于光照强度1000-2000Lux，光照时间12小时/天，昼温25±2℃，夜温20±2℃的条件下光照培养10-15天；

（6）生根培养：将3-4cm高的组培苗转接到生根培养基上，生根培养基的配方为：MS +ZT0.5mg/L + 6-BA1.0mg/L +TDZ0.1mg/L，0.1-0.5g/L活性炭，30g/L蔗糖，4.5g/L琼脂，pH为5.8-6.0；置于光照强度1000-2000Lux，光照时间12小时/天，昼温25±2℃，夜温20±2℃的条件下光照培养10-15天后，得到漆树生根苗，生根率高达89.2%。