[发明专利]一种能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体

权利要求书

1.一种能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体，其特征在于，该重组表达载体pET21b-HEMBP（Pyr）为原核表达载体，用于大肠杆菌的原核表达系统，通过如下步骤构建获得：

（1）构建重组质粒pUC57-HEMBP（Pyr）-Nb

人工合成HEMBP（Pyr）-Nb基因序列，其碱基序列具体如SEQ ID NO.1所示，与pUC57质粒进行连接，构建重组质粒pUC57-HEMBP（Pyr）-Nb；

（2）酶切，连接，具体过程为：

将步骤（1）中的重组质粒pUC57-HEMBP（Pyr）-Nb与质粒pET21b分别采用NdeI和XhoI进行双酶切；回收酶切产物；将酶切产物进行连接；

（3）转化、筛选，具体过程为：

将步骤（2）中的连接产物转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，进行抗性筛选；挑取阳性单菌落，提取质粒后进行NdeI和BamHI双酶切鉴定；鉴定正确的即为重组表达载体pET21b-HEMBP（Pyr）。

2.权利要求1所述能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体pET21b-HEMBP（Pyr）在蛋白表达中的应用，其特征在于，在大肠杆菌的原核表达系统中用于表达单克隆抗体Nb、PCV2VHHC3，抗原H5HA10、PCV2b cap、NLSFMD、HAFnt、FMDV98，多聚蛋白Cago60，CdiGMP499（Caulobacter vibrioides）、CdiGMP026（Phenylobacterium zucineum）或Propacid OAS。