[发明专利]利用UFLC法同时检测山茱萸中5种三萜酸成分的方法

说明书

本发明涉及利用UFLC法同时检测山茱萸中5种三萜酸成分的方法，先分别配置熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸和白桦脂酸的对照品溶液，对对照品溶液进行色谱分析，分别获得各组分的峰面积，以对照品溶液的进样量为横坐标，对照品溶液中各组分的峰面积为纵坐标分别绘制标准曲线；向山茱萸粉末中加入提取剂，提取得到样品溶液，将样品溶液抽滤，所得滤液为供试液；对供试液进行色谱分析，获得供试液中各被测组分的峰面积，计算得到各组分的含量，完成利用UFLC法同时对山茱萸中5种三萜酸成分的检测。本发明应用UFLC法，对山茱萸成分进行分析研究，显著减少分析时间，在9min内即可获得很好的分离效果；同时相应减少溶剂、样品消耗。

【技术领域】

本发明涉及成分检测领域，具体涉及利用UFLC法同时检测山茱萸中5种三萜酸成分的方法。

【背景技术】

山茱萸为山茱萸科植物山茱萸(Cornus offcinalis Sieb.et Zucc)的干燥成熟果肉，味酸、涩，性微温，归肝、肾经，具有补益肝肾、涩精固脱的功效。近年来山茱萸及其提取物已被证明有多种药理活性，如抗炎、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、保肝以及神经保护等作用。山茱萸中主要化学成分有环烯醚萜苷类、鞣质、黄酮、有机酸、多糖、三萜类、挥发性成分等。山茱萸中的三萜酸大部分属于三萜类中的五环三萜酸，目前检测到山茱萸三萜酸成分主要包括熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸、白桦脂酸，参见袁菊丽等.山茱萸的主要化学成分及药理作用[J].化学与生物工程,2011,05:7-9；刘博等.HPLC法测定山茱萸中科罗索酸的含量[J].药物分析杂志,2011,12:2217-2219；刘博,吴和珍.山茱萸药材中三萜类成分的研究[J].湖北中医杂志,2010,12:75-76。已有研究表明山茱萸中的三萜酸可以降低血糖、改善糖尿病并发症如心肌病变、视网膜病变、糖尿病肾病等，因此检测山茱萸中三萜酸成分及其含量对于预防和治疗糖尿病及其并发症具有指导意义。

目前关于山茱萸中三萜酸成分都是独立检测，金德庄等运用HPLC的方法分析山茱萸中熊果酸、齐墩果酸含量，刘博等运用HPLC法检测山茱萸中科罗索酸含量，山楂酸和科罗索酸、齐墩果酸和熊果酸为同分异构体，这5种酸同为山茱萸中三萜酸其结构和性质相似，用高效液相色谱法测定分析时间较长且不易分离，如何快速、准确地同时测定山茱萸中山楂酸、科罗索酸、白桦脂酸、齐墩果酸和熊果酸含量具有重要意义。

【发明内容】

本发明的目的在于克服现有技术中存在的问题，提供一种利用UFLC法同时检测山茱萸中5种三萜酸成分的方法，能够快速检测出山茱萸中5种三萜酸成分含量，且精确度高。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

包括以下步骤：

(1)分别配置熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸和白桦脂酸的对照品溶液，对对照品溶液进行色谱分析，获得熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸和白桦脂酸的峰面积，以对照品溶液的进样量为横坐标，对照品溶液中各组分的峰面积为纵坐标分别绘制标准曲线；

(2)向山茱萸粉末中加入提取剂，提取得到样品溶液，将样品溶液抽滤，所得滤液为供试液；

(3)对供试液进行色谱分析，获得供试液中各被测组分的峰面积，以供试液中各被测组分的峰面积为纵坐标代入标准曲线中，得出供试液中各被测组分的进样量，再计算得到供试液中熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸和白桦脂酸的含量，完成利用UFLC法同时对山茱萸中5种三萜酸成分的检测。

进一步地，步骤(1)中采用甲醇分别配置熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸和白桦脂酸的对照品溶液。

进一步地，步骤(1)中熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸和白桦脂酸的对照品溶液的浓度分别为0.8mg/mL、0.1mg/mL、0.005mg/mL、0.005mg/mL和0.001mg/mL。

进一步地，步骤(2)中提取剂为体积分数40～80％乙醇溶液。