[发明专利]一种利用抑菌培养基培育茶树的组培方法在审
申请号: | 201710040001.2 | 申请日: | 2017-01-18 |
公开(公告)号: | CN106857249A | 公开(公告)日: | 2017-06-20 |
发明(设计)人: | 叶乃兴;林庆良;金珊;杨国一;谢微微;叶卓昕;许子霄;屈艳勤 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 福州市众韬专利代理事务所(普通合伙)35220 | 代理人: | 陈智雄,黄秀婷 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 培养基 培育 茶树 方法 | ||
1.一种利用抑菌培养基培育茶树的组培方法,包括培养容器消毒、培养基配制、无菌水制备、诱导培养、增殖培养、生根培养和瓶苗移栽,其特征在于:
(1)培养容器消毒:将培养瓶、瓶盖及接种用的塑料盘在100mg/L次氯酸钠+10mg/L环丝氨酸+0.5mg/L十二烷基磺酸钠的水溶液中浸泡不少于10h,保存备用;
(2)培养基配制:诱导培养基为:MS+1~3mg/L 6-BA+0.1~1.0mg/L IBA+40~100mg/L次氯酸钠+5~10mg/L乳酸链球菌素+10~50mg/L丙酸钙+0.05~0.2mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8;增殖培养基为:MS+1~2mg/L 6-BA+0.1~0.5mg/L IBA+0.5~2mg/L GA3+40~100mg/L次氯酸钠+5~10mg/L乳酸链球菌素+10~50mg/L丙酸钙+0.05~0.2mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8;生根培养基为:1/2MS+1~3mg/L IBA+40~100mg/L次氯酸钠+5~10mg/L乳酸链球菌素+10~50mg/L丙酸钙+0.05~0.2mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8;所述MS,为1962年,Murashige和Skoog公开的MS培养基;所述6-BA,指6-苄氨基嘌呤;所述IBA,指α-吲哚丁酸;所述GA3,指赤霉素;配制培养基时,先称各培养基配方中的蔗糖和琼脂粉,加培养基总重量1/2的自来水,加热至琼脂粉完全溶解,再按各培养基配方配齐其他原料后,定容,然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8,分装到消毒过的培养容器中,封口,冷却凝固后备用;
(3)无菌水的制备:采用次氯酸钠、环丝氨酸、十二烷基磺酸钠和水配制无菌水,终浓度为100mg/L次氯酸钠、10mg/L环丝氨酸、0.5mg/L十二烷基磺酸钠,现配现用;
(4)诱导培养:剪取无病虫害生长健壮的茶树新梢,剪去叶片后,剪成2~3cm的带腋芽茎段,用洗衣粉浸泡冲洗15min后,用体积比为75%酒精消毒30s,再用重量体积比为0.1%升汞浸泡消毒12min,无菌水反复冲洗不少于3次;消毒后的茎段在无菌条件下接种于诱导培养基上,培养30d后长出新芽;培养室温度为26℃,光照12h,光照强度为1000Lx;
(5)增殖培养:将诱导出的茶树新芽转入增殖培养基中,30d后逐步诱导出丛生芽;将丛生芽切开,或将长的新芽再切成带腋芽的茎段,接种到增殖培养基上;每30d转接一次,获得大量幼芽;培养室温度为26℃,光照12h,光照强度为1500Lx;
(6)生根培养:取高度为3~5cm芽苗,接种到生根培养基上,培养25d后成为完整植株;培养室温度为26℃,光照12h,光照强度为1500Lx;
(7)瓶苗移栽:将生根培养获得的完整植株取出,洗净根部的培养基,用800倍的多菌灵浸泡30min后,移栽至透水性好的微酸性土壤中,大棚上层用遮光网遮盖,移栽的环境温度为22~28℃。
2.根据权利要求1所述的一种利用抑菌培养基培育茶树的组培方法,其特征在于所述诱导培养基为:MS+2mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA+60mg/L次氯酸钠+8mg/L乳酸链球菌素+30mg/L丙酸钙+0.1mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8。
3.根据权利要求1所述的一种利用抑菌培养基培育茶树的组培方法,其特征在于所述增殖培养基为:MS+1.5mg/L 6-BA+0.3mg/L IBA+1mg/L GA3+60mg/L次氯酸钠+8mg/L乳酸链球菌素+30mg/L丙酸钙+0.1mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8。
4.根据权利要求1所述的一种利用抑菌培养基培育茶树的组培方法,其特征在于所述生根培养基为:1/2MS+2mg/L IBA+60mg/L次氯酸钠+8mg/L乳酸链球菌素+30mg/L丙酸钙+0.1mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8。
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