[发明专利]一种对细胞中X染色体定量检测的方法和试剂盒有效

专利信息
申请号: 201710042837.6 申请日: 2017-01-20
公开(公告)号: CN108330187B 公开(公告)日: 2021-12-10
发明(设计)人: 赵欣之;张强;郭晓红;田天;王腾 申请(专利权)人: 复旦大学附属儿科医院
主分类号: C12Q1/6869 分类号: C12Q1/6869
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人: 吴桂琴
地址: 201102 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 细胞 染色体 定量 检测 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种对细胞中X染色体定量检测的试剂盒,其特征在于,含SAT1UXTUTP14A基因启动子区序列作为XIDMR,以及包含对DNA甲基化检测的前处理试剂,用于对细胞中X染色体检测定量;

所述XIDMR,SAT1基因XIDMR序列如SEQ ID NO:1所示,UXT基因XIDMR序列如SEQ ID NO:2所示,UTP14A基因XIDMR序列如SEQ ID NO:3所示。

2.如权利要求1的对细胞中X染色体定量检测的试剂盒,其特征在于, DNA前处理采用亚硫酸盐氧化法,将未甲基化的胞嘧啶(C)氧化为尿嘧啶(U),并在后续聚合酶链式反应(PCR)中转化为胸腺嘧啶(T)。

3.如权利要求1所述试剂盒,其特征在于,还包含对所述XIDMR进行扩增的试剂和引物;扩增通过PCR反应进行。

4.如权利要求3所述试剂盒,其特征在于,扩增SAT1基因XIDMR的引物对序列为SEQ IDNO:4和SEQ ID NO:5;扩增UXT基因XIDMR的引物对序列为SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7;扩增UTP14A基因XIDMR的引物对序列为SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9,其中SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:7和SEQ ID NO:9所述序列引物5’端使用生物素标记。

5.如权利要求1所述试剂盒,其特征在于,包含对XIDMR进行焦磷酸测序检测DNA甲基化的引物,其中,SAT1基因XIDMR的焦磷酸测序引物为SEQ ID NO:10;UXT基因XIDMR的焦磷酸测序引物为SEQ ID NO:11;UTP14A基因XIDMR的焦磷酸测序引物为SEQ ID NO:12。

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