[发明专利]一种快速检测钙卫蛋白的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医学免疫体外诊断领域，特别涉及一种钙卫蛋白检测试剂盒。

背景技术

钙卫蛋白是一个分子量为36kD的钙、锌结合蛋白。由两条分子量为14kD的重链和一条分子量为8kD的轻链以共价键连接的钙结合蛋白质异三聚体组成。每条链可结合两个Ca²⁺，从而具有耐热性和增强水解性的特性。

钙卫蛋白主要来源于中性粒细胞和单核细胞，具有多种生物学功能，体外研究表明它具有抑菌性能，抑菌效果可与抗生素相提并论。钙卫蛋白是中性粒细胞和活化的巨噬细胞质中重要的蛋白质，在许多炎症情况下含量增加，可作为急性炎症性标志物。

目前虽然钙卫蛋白在人类生物体中多处被发现，包括：血清、唾液、脑脊液和尿液。但在粪便中容易测得，且其成分稳定，室温下可在大便中稳定存在7d左右，且不易被细菌和各种酶类破坏，不受饮食的影响。粪便的钙卫蛋白的检测是一种简单、迅速的、灵敏度高、特异性强、廉价的、非侵袭的炎性肠病检测方法。这种检测方法可以在正常人的黏膜和患病患者的炎性黏膜中都可以获得准确的检测结果。

钙卫蛋白被认为是多种疾病中可靠的炎症指标，它可以清楚的区分器质性疾病如炎症性疾病IBD和功能性疾病如IBS。这种体外诊断工具可以避免昂贵的费用和结肠镜侵入性的检查。2005年3月14-17日在伯明翰召开的英国肠胃病学学会(BSG)年会，专题讨论了炎症性肠病(IBD)-钙卫蛋白-肠激惹综合征(IBS)，将钙卫蛋白作为一个新的有用的诊断参考标志，用于：区别炎性肠病和肠激惹综合征；评估炎性肠病炎活动性；评价炎性肠病黏膜治愈情况。

对于钙卫蛋白的检测，目前临床的方法包括：酶联免疫法(ELISA)、胶体金法等方法，但这些方法都有各自的特点及不足。ELISA法由于定量准确，广泛应用于医院检验科，但检测时间长，不便捷；胶体金法虽然方便、快捷，但其是一种定性方法，灵敏度较低；因此，临床上迫切需求建立一种快速、便捷、经济的钙卫蛋白定量检测方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种检测钙卫蛋白的试剂盒，采用该试剂盒检测钙卫蛋白时，操作方便快捷、特异性强、灵敏度高、重复性好、成本低、检测结果准确且抗干扰能力强，适于临床快速检测。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现:

本发明第一方面提供了组合物，包括如下组分：含多聚物的缓冲液；以及结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液。所述多聚物为Triton系列表面活性剂、Tween系列表面活性剂、月桂醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚和聚氧乙烯辛基苯醚中的至少一种。所述聚苯乙烯胶乳的颗粒直径为100-300nm。

在一优选例中，所述含多聚物的缓冲液中，多聚体的质量占其总体积百分比为0.1％-5.0％。

在一优选例中，结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液的固含量w/v为0.5-5.0％。

在一优选例中，所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液中的聚苯乙烯胶乳与抗人钙卫蛋白抗体的包被是采用化学交联法制备；

在一优选例中，所述化学交联法采用的化学交联缓冲液选自2-(N-吗啡啉)乙磺酸MES缓冲液、3-吗啉-2-羟基丙磺酸MOPSO缓冲液、3-(N-吗啉)丙磺酸MOPS缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES缓冲液和磷酸缓冲液中的至少一种。

在一优选例中，所述化学交联法采用的化学交联剂选自碳化亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、酰肼和异氰酸酯中的至少一种。

在一优选例中，所述含多聚物的缓冲液包括如下组分：三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、Triton X-100、牛血清蛋白、乙二醇聚氧乙烯醚和叠氮钠；或所述含多聚物的缓冲液包括如下组分：三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、Tw een-20、牛血清蛋白、乙二醇聚氧乙烯醚和叠氮钠；或所述含多聚物的缓冲液包括如下组分：磷酸盐、氯化钠、Triton X-100、牛血清蛋白、乙二醇聚氧乙烯醚和叠氮钠；所述结合抗人钙卫蛋白抗体的聚苯乙烯胶乳溶液包括如下组分：磷酸盐、抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒、氯化钠、牛血清蛋白和叠氮钠。

在一优选例中，所述含多聚物的缓冲液包括如下浓度的各组分：

三羟甲基氨基甲烷或磷酸盐20-100mmol/L

氯化钠7-10g/L

Triton X-100或Tween-204-12g/L

牛血清蛋白4-7g/L

乙二醇聚氧乙烯醚40-60g/L

叠氮钠3-6g/L。