[发明专利]一株重组大肠杆菌及其在制备抗志贺氏菌的糖疫苗中的应用有效
申请号: | 201710046262.5 | 申请日: | 2017-01-22 |
公开(公告)号: | CN106801029B | 公开(公告)日: | 2020-05-01 |
发明(设计)人: | 陈敏;孔蕴;曲亚军 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;A61K39/112;A61P31/04;C12R1/19 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
地址: | 250100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 大肠杆菌 及其 制备 抗志贺氏菌 疫苗 中的 应用 | ||
1.一种能表达痢疾志贺氏菌1型病原菌的脂多糖合成酶基因簇的重组大肠杆菌,其特征在于:所述重组大肠杆菌含有痢疾志贺氏菌1型病原菌rfb基因簇中的rfbR(rhamnosyltransferase),rfbQ(rhamnosyltransferase)和orf9(galactosyltransferase),其基因型是W3110Δwbbl/p-rfp+p-rfbR-rfbQ-orf9。
2.权利要求1所述能表达痢疾志贺氏菌1型病原菌的脂多糖合成酶基因簇的重组大肠杆菌的构建方法,步骤是:
构建含痢疾志贺氏菌1型病原菌rfb基因簇中的rfbR(rhamnosyltransferase),rfbQ(rhamnosyltransferase)和orf9(galactosyltransferase)三个基因的表达载体p-O-Ag,再构建rfp基因的表达载体p-rfp,然后将所述构建的重组质粒p-O-Ag和p-rfp共转化大肠杆菌K12W3110,即得到能表达痢疾志贺氏菌1型病原菌的脂多糖合成酶基因簇的重组大肠杆菌;
其中,所述包含有rfbR(rhamnosyltransferase),rfbQ(rhamnosyltransferase)和orf9(galactosyltransferase)三个基因的rfb基因簇O-Ag来源于痢疾志贺氏菌1型病原菌的基因组,其表达rfb基因簇的载体为pACT3;所述rfp基因存在于痢疾志贺氏菌1型病原菌中的9Kb游离质粒,其表达rfp基因的载体为pET15b;所述大肠杆菌K-12W3110,由于插入子IS5的插入从而打断了WbbL的功能,其基因型为W3110Δwbbl。
3.权利要求1所述能表达痢疾志贺氏菌1型病原菌的脂多糖合成酶基因簇的重组大肠杆菌在制备抗痢疾志贺氏菌1型病原菌的糖蛋白疫苗中的应用。
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