[发明专利]一种油包水连续相、其制备方法及应用

说明书

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种油包水连续相、其制备方法。该种连续相包含：两种或两种以上可交联固化组分和一种或多种乳化剂。由于本发明的连续相可固化为固态或半固态，对生成的液滴具有保护和支撑作用，不存在液滴不稳定现象，不会出现液滴融合、破裂和卫星液滴现象。此外，该连续相常温状态为粘度适中液体，在液滴制备过程中，形成液滴稳定，同时对外部设备要求也小，尤为适用于数字Elisa，数字PCR，单细胞分析等相关的微流控芯片应用领域。本发明同时提供该种连续相的制备方法以及进一步制备成油包水液滴的应用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种油包水连续相、其制备方法及应用。

背景技术

“油包水”是分散相以小液滴形式分散于连续相中的一种存在形式，是由水相(包含各种水溶液)，油相(可以是多种油的混合物)和乳化剂(亲水亲油两性分子)在一定的比例条件下形成的热力学稳定体系。自“油包水”液滴方法产生以来，它就被证明是一种良好的微型反应器，并被广泛使用。目前“油包水”形式也越来越多的应用于生物技术领域，如数字ELISA，数字PCR，单细胞分析，蛋白结晶等。

“油包水”体系中微液滴生成方式主要有微流控芯片法、微筛法以及悬浮混匀法，而微流控芯片法又分为液滴固定在固定的腔室中的腔室型和液滴可在油相中自由流动的液滴型两种。无论哪种类型，当分散相为水或者水溶液时，要求连续相：1)液态；2)与水互不相溶；3)生物相容性好；4)液体粘度低(1cps～500cps)。

目前在生物技术领域比较常用的连续相为：油脂类，如矿物油(液体石蜡，mineraloil)；酯类，如碳酸二乙基己酯(tegosoft DEC)；氟化液，如HFE-7200，等等。但是由于连续相与水的热膨胀系数不同液滴会在长时间静置或升降温过程中发生融合，破裂，形成卫星液滴等各种不稳定现象，从而影响生物反应的稳定性以及反应后数据分析的准确性。

发明内容

本发明的目的在于针对上述现有技术的不足，提供一种可交联固化的油包水连续相。

本发明的另一目的在于提供上述油包水连续相的制备方法。

本发明的还一目的在于提供上述油包水连续相的应用。

为解决上述技术问题，本发明的实施方式提供了一种油包水连续相，该种连续相包含：(1)两种或两种以上可交联固化组分；和：(2)一种或多种乳化剂。

本发明的实施方式所提供的连续相具有以下特点：1)常温液态；2)与水互不相溶；3)生物相容性好；4)高温交联为固体或半固体状态。由于本发明的实施方式所提供的连续相可固化为固态或半固态，对生成的液滴具有保护和支撑作用，不存在液滴不稳定现象，不会出现液滴融合、破裂和卫星液滴现象。此外，该连续相常温状态为粘度适中液体，在液滴制备过程中，形成液滴稳定，同时对外部设备要求也小。

具体地，在本发明的实施方式所提供的油包水连续相中，所包含的两种或两种以上可交联固化组分可以包含含氢硅油、端乙烯基硅油和催化剂；或包含环氧树脂和固化剂。

更具体地，本发明的实施方式所提供的油包水连续相以质量份计可以包含：含氢硅油40～90份、端乙烯基硅油10～60份、催化剂0.01～1份和乳化剂0～1份。或者，本发明的实施方式所提供的油包水连续相以质量份计包含：环氧树脂50～90份、固化剂10～50份和乳化剂0～1份。

本发明的实施方式利用特殊的固化机理来开发可固化的“油包水”连续相。含氢硅油和端乙烯基硅油在催化剂的作用下，可交联为固态或半固态；环氧树脂和固化剂互混后可热固化。本发明将这些机理应用于“油包水”制备，代替传统连续相，从而得到可固化的“油包水”连续相应用方案。其中含氢硅油和端乙烯基硅油，以及环氧树脂和固化剂常温状态下都为疏水液体，不溶于水，生物相容性好。另外，本连续相中的乳化剂可有效稳定生成的液滴，防止液滴形成过程中出现破裂和融合。