[发明专利]一种富含黄酮类化合物的活性多糖及其制备方法

权利要求书

1.一种富含黄酮类化合物的活性多糖的制备方法，包括如下步骤：

（1）花生壳经清洗、烘干、超微粉碎后与水混合，添加由内切葡聚糖酶突变体和外切纤维素酶突变体组成的复合酶，微波辅助酶解；

（2）微波辅助同步提取步骤（1）所得混合物中的水溶性多糖和黄酮类化合物；

（3）真空抽滤步骤（2）所得混合物，保留抽滤液，并经真空旋转蒸发得到浓缩液，浓缩液冷却后，加入预冷的乙醇，并于4℃条件下放置12 h，离心收集沉淀，同时保留上清液；

（4）步骤（3）所得沉淀加水复溶，离心收集上清液，加入预冷的乙醇，并于4℃条件下放置12 h，离心收集沉淀，经真空干燥得到活性多糖；

（5）步骤（3）所得上清液经真空旋转蒸发除去乙醇，选择截留分子量为20 kDa的超滤膜进行超滤，保留透过液，所得透过液溶解步骤（4）所得活性多糖，该混合物经冷冻干燥获得富含黄酮类化合物的活性多糖；

所述的内切葡聚糖酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述的外切纤维素酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。

2.根据权利要求1所述的复合酶，其特征在于，内切葡聚糖酶突变体与外切纤维素酶突变体复配的比例为5:3~3:1。

3.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微波辅助酶解的条件为：按料液比1:10~1:50混合粉碎的花生壳与水，添加0 .5~2 .5 g复合酶，50℃下微波辅助酶解10-30 min。

4.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微波辅助同步提取的条件为：微波辅助提取温度60~80℃，微波辅助提取时间8~15 min。