[发明专利]一种由川芎醇提物制备的含药血清及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物药物领域，具体涉及一种由川芎醇提物制备的含药血清及其制备方法和在治疗骨肉瘤上的应用。

背景技术

骨肉瘤是骨与关节系统肿瘤中最常见的骨原发恶性肿瘤。超过85％的骨肉瘤是原发性骨肉瘤，常发于儿童和青少年期，发病率约达6-10/100万，男女发病比率约为1.5:1，其中近80-90％的骨肉瘤病发于四肢长管状骨干骺端。骨肉瘤源于间胚叶组织，它的发病机理是由于未分化的肿瘤细胞发生生物学形态的变化，直接形成骨样或者未成熟的骨样组织，直至目前其发生机理仍未完全清楚，关于骨肉瘤的研究仍未有很大的进展。因此，寻找能够治疗骨肉瘤的有效且副作用小的中西药物成为学者们不懈努力的追求方向。随着骨肉瘤的多发性，许多学者在中药提取物对骨肉瘤细胞系体外培养生长的抑制作用以及对细胞周期、细胞凋亡、迁移能力的影响等方面作了很多的探索，为新的植物型药物的发现和研制提供了线索，也为本发明提供了新的思路。

中药是中华民族伟大文化遗产的瑰宝，它们在人类与疾病的斗争中扮演着至关重要的角色，并且在世界医药发展史上占有着重要的地位。随着科学技术的不断发展，人们对中药及中药复方的认识和要求不断提高，中药及中药复方的现代化发展已经迫在眉睫。中医认为，癖滞贯穿于肿瘤的全病程，是恶性肿瘤发生及发展的最主要病因病机。根据中医治疗疾病辨证论治的原则，使用活血化癖药治疗恶性肿瘤应用较为广泛。临床中较常用的活血化癖药物有川芎、丹参、大黄、红花、三棱、川棘子、归尾等，其中川芎的药效极佳。川芎为伞形科藁本属植物川芎(Ligusticum Chuanxiong Hort)的干燥根茎，其主要的化学成分是川芎嗪、阿魏酸、蒿本内酯、川芎内酯、川芎酚、大黄酚、瑟丹酸、亚油酸、黑麦草碱等。其性辛香行散味微苦，药性温和通血脉，上行头颠，下走血海。川芎常被用于活血行气，祛风止痛，以及治疗头痛，胸胁痛，经闭腹痛，风湿痛，跌打损伤等症。近年来，川芎在临床上广泛应用于治疗冠心病、偏头痛、缺血性脑中风等病症，尤其是在缺血性脑中风的治疗中显出了独特优势。已有研究证明川芎对肺癌、前列腺癌、脑肿瘤、溃疡性结肠炎等疾病均有良好的治疗效果。且经检索发现，乙醇和乙醚是提取川芎有效成分常用的溶剂，乙醇因对有效成分的提取较完全而更为常用，是提取效果较佳的溶剂。因此本发明采取的提取川芎有效成分的方法为乙醇提取法。

近年来中药血清药理学的相关研究在中药或中药复方研究上有了新的进展，它主要是通过模拟中药或中药复方在体内的消化、吸收、转化、代谢的一些过程，然后通过采集服用(或注射)中药的动物的血液并分离血清，进行体外培养实验研究的一种新的方法。中药服用或注射的方法及简称如下：静脉注射(iv)、腹腔注射(ip)、口服(po)、皮下注射(ih)、灌胃(ig)肌注(im)、静滴(iv)等。这种实验方法的提出，既可以在一定程度上排除中药或中药复方直接进行体外实验产生的难以确定的因素干扰，也可以使实验结果的可信度大大提高，更重要的是中药血清使疗效更加显著。张明辉等研究发现，经川芎、苏木灌胃大鼠后处理得到的含药血清在常氧环境下作用24h时能够抑制PG人高转移性巨细胞肺癌细胞的增殖，并且在低氧环境更有利于其促进PG细胞增殖。芦冲等研究发现，经半枝莲醇提物灌胃大鼠后获得的含药血清对HT-29人结肠癌细胞有抑制作用，作用机制可能不仅与抑制细胞生长有关，还与阻滞细胞生长周期及诱导细胞凋亡有关。范钦等研究发现，九香虫灌胃大鼠后处理得到的含药血清孵育SW480人结肠癌细胞，可促使结肠癌细胞凋亡，并影响凋亡相关因子P53、FADD的表达，从而达到抗肿瘤作用。丰俊东等研究发现，TMP(川芎嗪)盐酸注射液ip注射大鼠后处理得到的含药血清对人肝癌细胞Hep G2增殖具有一定的抑制作用。目前常见的骨肉瘤细胞系有Saos-2、MG-63、M663、U2-OS、143B，HOS、SOSP-9607，F5M2、F4、MNNG/HOS、SW1353、UMR106等。但暂未发现使用川芎制备的含药血清对MG-63人成骨肉瘤细胞做相关研究的报道。

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明提供一种由川芎醇提物制备的含药血清；该含药血清可有效抑制骨肉瘤细胞的增殖、促进其凋亡、抑制其转移。

本发明还提供一种由川芎醇提物制备的含药血清的制备方法及其应用。

技术方案：为了实现上述目的，如本发明所述的一种由川芎醇提物制备的含药血清，所述含药血清为将川芎醇提物对大鼠进行灌胃后，采血得到。

其中，所述川芎醇提物为将川芎粉碎成粉末状后加入乙醇回流提取，冷冻干燥后粉碎所得的粉末状固体。