[发明专利]一种抑制肿大细胞病毒在大菱鲆中复制的方法

说明书

技术领域

本发明涉及病毒学领域，具体的说是一种低温抑制肿大细胞病毒在大菱鲆中复制的方法。

背景技术

温度是鱼类最重要的环境因子之一，它能够通过改变鱼类新陈代谢和蛋白质合成等方面的功能，进而影响鱼的生长、存活和抗病能力。肿大细胞病毒(Megalocytivirus)属于虹彩病毒科，是一种大型、正二十面体的双连DNA病毒。肿大细胞病毒是一种鱼类的重要病毒，能够感染多种经济鱼类，包括大菱鲆(Scophthalmus maximus)。目前肿大细胞病毒病的防治尚无有效措施。同时关于通过温度控制大菱鲆病毒感染方面的研究尚无报道。

发明内容

本发明目的在于提供一种低温抑制肿大细胞病毒在大菱鲆中复制的方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种抑制肿大细胞病毒在大菱鲆中复制的方法：将感染肿大细胞病毒的大菱鲆在低温养殖，进而使得肿大细胞病毒得以抑制。

所述低温指14℃至16℃。所述经低温培养感染肿大细胞病的大菱鲆的存活率得以提升。

本发明具有如下优点：

1.本发明的方法能够通过温度调控有效抑制肿大细胞病毒在大菱鲆中复制。

2.本发明的方法不用施加抗生素等药物。

附图说明

图1为本发明实施例提供的低温对肿大细胞病毒在大菱鲆中复制的抑制情况图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例旨在对本发明进行举例描述，而非以任何形式对本发明进行限制。

实施例1：低温抑制肿大细胞病毒在大菱鲆中复制。

将肿大细胞病毒RBIV-C1(参见Zhang M,Xiao Z,Hu Y,Sun L.Characterization of a megalocytivirus from cultured rock bream,Oplegnathus fasciatus(Temminck&Schlege),in China.Aquac Res.2012；43:556–64。)悬浮于PBS中至2x10⁶copies/ml，即为病毒悬液。将120条大菱鲆(每条重约13.5g)随机分为4组(30条/组)，分别命名为A、B、C和D。将每条鱼腹腔注射50μl上述病毒悬液。将A、B、C和D组鱼分别在14℃、16℃、20℃和22℃养殖。在病毒注射后2、6、10、12、16和18天，取鱼脾脏组织，利用DNA提取试剂盒(购于天根生化科技(北京)有限公司)从组织中提取DNA，用绝对定量PCR法检测组织中病毒含量(具体方法见上述参考文献Zhang M,Xiao Z,Hu Y,Sun L.Characterization of a megalocytivirus from cultured rock bream,Oplegnathus fasciatus(Temminck&Schlege),in China.Aquac Res.2012；43:556–64。)。结果表明，A组和B组鱼的病毒数几乎检测不到，且随着时间进程没有显著变化；与此相反，C和D组鱼的病毒数随着时间进程不变增加，其中D组鱼在12天以后全部死亡，因此病毒数只计算到12天。结果见图1。这些结果表明14℃和16℃的低温能有效抑制肿大细胞病毒复制。

所述PBS组成成分按重量百分比计：0.8％NaCl,0.02％KCl,0.358％Na₂HPO₄.12H₂O,0.024％NaH₂PO₄，余量为水。

另外，再另选取与上述同样条件的120条大菱鲆(同上)随机分为4组(30条/组)，分别命名为A、B、C和D。将每条鱼腹腔注射50μl上述实施例1的病毒悬液。将A、B、C和D组鱼分别在14℃、16℃、20℃和22℃养殖。在以后的30天中，每天观察并记录各组鱼的死亡情况。30天后，统计各组鱼的总死亡数目：A组，0条；B组,0条；C组，30条；D组，30条。由上述结果表明14℃和16℃的低温可以抑制肿大细胞病毒复制，从而提升病毒感染鱼类的存活率。