[发明专利]含人类免疫缺陷病毒RNA片段的假病毒颗粒及其制备方法有效
| 申请号： | 201710058509.5 | 申请日： | 2017-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN106755043B | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 乐小炎;彭春梅;邓可基;张晓玮;李家导;张嘉;李海茵;林志豪;林敏深;林若琳;谢丽娟;罗园香;石壮壮;王法;王星;张新;莫静嫣;陈观芝;陈凤英 | 申请（专利权）人： | 广州海力特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N7/04 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 胡辉 |
| 地址： | 510730 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 人类 免疫 缺陷 病毒 rna 片段 颗粒 及其 制备 方法 | ||
1.一种含人类免疫缺陷病毒RNA片段的假病毒颗粒的制备方法，其制备步骤是：
1)制备含MS2基因序列的克隆质粒；
2)筛选HIV基因保守序列，制备HIV克隆质粒；
3)双质粒共转染，诱导表达假病毒颗粒；
MS2基因序列为MS2基因22-1786bp之间序列；
HIV基因保守序列为env、gap、pol基因中保守序列；
HIV克隆质粒中，HIV基因保守序列与MS2基因的识别位点链接在一起，env、gap、pol基因中保守序列中任一个序列与1个或2个MS2基因的识别位点链接；
MS2基因的识别位点由MS2噬菌体RNA茎环结构组成；
MS2噬菌体RNA茎环结构的序列是：5’-ACAUGAGGAUCACCCAUGU-3’(SEQ ID NO:1)；
HIV克隆质粒中含有3或4个识别位点；
HIV克隆质粒中含有4、5或6个MS2噬菌体RNA茎环结构；
HIV克隆质粒中，HIV基因保守序列与MS2基因的识别位点链接顺序如下列任意一种所示：
1)HIV克隆质粒中含有4个识别位点，6个MS2噬菌体RNA茎环结构，排列顺序是识别位点a-env-识别位点b-gag-识别位点c-pol-识别位点d；其中识别位点a含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点b含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点c含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点d含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构；
2)HIV克隆质粒中含有3个识别位点，4个MS2噬菌体RNA茎环结构，排列顺序是识别位点a-env-识别位点b-gag-pol-识别位点c；其中识别位点a含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点b含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点c含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构；
3)HIV克隆质粒中含有3个识别位点，6个MS2噬菌体RNA茎环结构，排列顺序是识别位点a-env-识别位点b-gag-pol-识别位点c；其中识别位点a含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点b含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点c含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构；
4)HIV克隆质粒中含有3个识别位点，5个MS2噬菌体RNA茎环结构，排列顺序是识别位点a-env-识别位点b-gag-pol-识别位点c；其中识别位点a含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点b含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点c含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构；
5)HIV克隆质粒中含有4个识别位点，5个MS2噬菌体RNA茎环结构，排列顺序是识别位点a-env-识别位点b-gag-识别位点c-pol-识别位点d；其中识别位点a含有2个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点b含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点c含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构，识别位点d含有1个MS2噬菌体RNA茎环结构。
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