[发明专利]化学品毒性藻红外测试的三指标评价方法

说明书

本发明公开了一种化学品毒性藻红外测试的三指标评价方法，该方法采用对照组与加药组的最大藻温差绝对值的比较值、对照组与加药组的平均藻温差之和的比较值和藻响应率（ψ）的三个指标评价藻对药液的响应，相较于采用加药组最大藻温差绝对值与对照组最大藻温差绝对值的正差值的一指标法，本发明方法有效降低了分析结果的偶然性，保证了测试藻对药液响应结果的质量，能够控制假结果出现率为20%，由其评价藻响应重金属的灵敏度为0.001～0.1mg/L，由其得到的测试结果的平均重现率为86.8～100％、重现性的出现率为100%，具有准确性高，重复性好，灵敏度高的特点。

技术领域

本发明属于化学品急性毒性检测领域，尤其涉及一种化学品毒性藻红外测试的三指标评价方法。

背景技术

藻类细胞具有光合磷酸化和氧化磷酸化的两套能量代谢系统，毒物作用前后藻代谢能量会产生微量变化，这种微能量变化可被红外测温仪测试，对测试藻温进行处理便能分析藻对毒物的响应。该技术具有快速、简便、价廉、可现场测试等特点，然而，该技术一直存在4个问题：一是未考虑红外测温仪测试的末位藻温波动性，每次每个测试杯只测1个藻温，与波动藻温平均值的偏差较大；二是未考虑到两个测试杯的藻温之差伴随整个测温过程，在毒性测试藻响应温差时未减去；三是用加药组和对照组只能得到1种藻温差，不能藻温差比较分析；四是只用了藻响应温差这一个指标分析藻对毒物的响应，效果较差。这4个问题的存在，使藻红外测试技术测试毒物毒性的性能较低。

目前，国内外关于急性毒性的单细胞微生物测试法改进的研究报道主要有发光细菌生物毒性测试方法的改进、发光细菌毒性测试条件的优化、发光细菌急性毒性测试方法的优化、水质急性毒性发光细菌测试法的改进、对测试水质发光细菌的菌种进行改进、MenzJ等对发光细菌法进行改进。关于藻红外测试研究有敏感藻的确定方法、重金属急性毒性藻红外测试、农药急性毒性藻红外测试、有机毒害物急性毒性藻红外测试、急性毒性藻红外测试中联合作用的评价方法、藻红外测试多元有机毒物急性毒性的初步分析、急性毒性藻红外测试中联合作用评价法的重现性，有关化学品急性毒性藻红外测试技术改进方法的研究尚未见报道。

发明内容

本发明针对现有藻红外测试方法测试毒物毒性性能较低的问题，提供一种化学品毒性藻红外测试的三指标评价方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种化学品毒性藻红外测试的三指标评价方法，包括以下步骤：

(1)藻响应测试

选择滇池铜绿微囊藻为供试藻，其藻密度≥3.16×10⁹个/L；

藻温测试过程：空白组3重复，对照组3重复，加药组3重复，在每个测试杯中分别加入5mL藻液，加完后测试每个测试杯的藻温；

然后进行以下加药测试：①蒸馏水毒性测试时，用滴液管分别滴加蒸馏水0.05mL于加药组和对照组的测试杯中，待藻温稳定时测试每个测试杯的藻温；②待测药品的毒性测试时，用滴液管滴加0.05mL待测药液于加药组的测试杯中，用滴液管滴加蒸馏水0.05mL于对照组的测试杯中，滴加完后测试每个测试杯的藻温；

(2)数据分析

藻响应温差计算方法为：ΔT＝∣ΔT_j∣―∣ΔT_d∣，ΔT＞0

加药组藻温差计算方法为：ΔT_j＝(T_j-ti-T_j-t0)-(T_k-ti-T_k-t0)

对照组藻温差计算方法为：ΔT_d＝(T_d-ti-T_d-t0)-(T_k-ti-T_k-t0)