[发明专利]一种生物法生产海鱼小分子蛋白质的方法

权利要求书

1.一种生物法生产海鱼小分子蛋白质的方法，其特征在于通过以下步骤实现：

（1）制醪：取木薯干和玉米磨碎成可过40目筛的细粉，取海鱼制成鱼糜，加足量的水配成混合液，此时混合液中木薯干的浓度为3～6%，玉米的浓度为1～2%，海鱼糜的浓度为10～15%，将此混合液经胶体磨后，于75～85℃保温搅拌30min，完成糊化，然后分别加入淀粉酶和糖化酶，于55～65℃保温搅拌30min，完成糖化，再将此糖化后的醪液用硫酸调pH至4.0～4.5，经超高温灭菌，在无菌条件下冷却至30℃保存待用；

（2）接种：取一定量的活性干酵母，与6～8倍的水和6～8倍待用的醪液混合后，30℃保温30min，然后加入已冷却好的醪液，完成接种；

（3）发酵：开动搅拌器进行通风培养，培养过程中每隔2h开机搅拌通风一次，发酵过程分三阶段，发酵液以糖度降低到0.1°Bx以下，酒精度达到10%以上为准；

（4）分离：将发酵液使用卧螺离心机分离出固体残渣，此残渣中包含酵母菌体、木瓜干和玉米的纤维残渣、鱼肉中的破碎骨骼，以及由乙醇沉淀出的糖类物质和大分子蛋白质，然后将分离得到的液体经两相碟片式离心机分离得到乳化液和清液，此乳化液中包含玉米和鱼肉中的脂肪及脂溶性成分，而清液中则富集着经酵母蛋白酶消化水解后得到分子量较小的海鱼小分子蛋白；

（5）纯化：将碟片离心机所得清液经100k～200kDal截留分子量的超滤膜过滤，所得滤出液再经100～200Dal截留分子量的纳滤膜浓缩，所得浓缩液即为经纯化后的海鱼小分子蛋白液；

（6）聚合：再将纳滤膜浓缩液中添加谷氨酰胺转氨酶，于40℃条件下保温搅拌4～10h，以完成小分子蛋白质的聚合，使其分子量扩大到2000～4000Dal；

（7）干燥：将经过酶聚合的纳滤膜浓缩液使用喷雾干燥或冷冻干燥去除水分，得到干燥的海鱼小分子蛋白质。

2.根据权利要求1所述的一种生物法生产海鱼小分子蛋白质的方法，其特征在于：所述步骤（1）中加入的淀粉酶和糖化酶分别为木薯干与玉米总质量的0.1～0.5%和0.5～1%。

3.根据权利要求1所述的一种生物法生产海鱼小分子蛋白质的方法，其特征在于：所述步骤（2）中活性干酵母的用量为木薯干和玉米总质量的0.1～0.2%。

4.根据权利要求1所述的一种生物法生产海鱼小分子蛋白质的方法，其特征在于：所述步骤（3）中发酵过程的三个阶段分别为：一阶段于30℃培养8～10h，二阶段于32~34℃培养10～12h，三阶段于30～32℃培养30~35h。

5.根据权利要求1所述的一种生物法生产海鱼小分子蛋白质的方法，其特征在于：所述步骤（6）中加入添加谷氨酰胺转氨酶的量为纳滤膜浓缩液的1～2%。