[发明专利]一种从积雪草出发制备积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B的方法

权利要求书

1.一种从积雪草出发制备积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B的方法，其特征在于：所述的方法包括如下步骤：

1)取积雪草，用水提取，过滤后离心，上大孔树脂，用pH值为9～12的碱溶液洗涤，再加水洗至流出液呈中性，用乙醇进行洗脱，收集醇洗脱液，回收乙醇，浓缩，喷雾干燥，得到喷雾粉；

2)用甲醇将喷雾粉溶解，过滤，滤液静置，析出白色结晶物，过滤，母液挥去部分甲醇再重复静置析晶，析出物用乙酸乙酯洗涤，重复析晶，析出物用甲醇温热溶解，过滤，滤液水浴挥去甲醇，收集液面析出的白色物料，水液备用；析出物用甲醇反复析晶，最后得到结晶物，干燥得到白色不定型固体A，经结构鉴定为积雪草苷；

3)析晶的母液回收溶剂和步骤2)备用的水液合并过滤，滤液上MCI树脂柱，用水洗至流出液颜色变淡，再依次用30％、60％的甲醇溶液适量进行洗脱，分段收集醇洗脱液，蒸干，浓缩，用甲醇溶解，过滤，滤液静置析晶，重复多次析晶，结晶物用流动相溶解，上反相中压柱层析，用乙腈-水或乙醇-水或甲醇-水进行反复洗脱，得到白色不定型固体B，经结构鉴定为羟基积雪草苷；

4)步骤3)中MCI树脂柱30％甲醇洗脱液的母液回收溶剂，蒸干，残渣用甲醇溶解，过滤，静置析晶，析出物用甲醇溶解，过滤，重复多次析晶，直到析出物为白色针晶状物质，过滤，结晶物用混合溶液溶解，上反相中压柱层析，用乙腈-水或乙醇-水进行反复洗脱，得白色不定型固体C，经结构鉴定为积雪草苷B。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的碱溶液的用量为1～8倍量柱体积。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的碱溶液的用量为1～3倍量柱体积。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的碱溶液的用量为1.5倍量柱体积。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的大孔树脂为非极性或弱极性大孔树脂。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的非极性或弱极性大孔树脂为D-101型大孔树脂、AB-8型大孔树脂或HPD-100型大孔树脂。

7.根据权利要求1-6任意一项所述的方法，其特征在于，步骤4)中，所述的静置析晶为置于温度10℃以下的环境中静置析晶。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的静置析晶为置于温度-10～10℃的环境中静置析晶。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的静置析晶为置于温度-5～5℃的环境中静置析晶。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的用乙醇洗脱为用40％～80％的乙醇1～8倍柱体积进行洗脱。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤2)中，用于温热溶解的甲醇为60～80％甲醇，用于反复析晶的甲醇为80％甲醇。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，步骤3)中，

所述的流动相为乙腈-水或乙醇-水或甲醇-水；

所述的反复洗脱用的乙腈-水、乙醇-水或甲醇-水为体积比20:80的乙腈-水、体积比40:60的乙醇-水或体积比40:60的甲醇-水。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，步骤4)中，所述的混合溶液为乙腈-水、乙醇-水或甲醇-水的混合溶液。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，所述的混合溶液为体积比20：80的乙腈-水、体积比40：60的乙醇-水或体积比50：50的甲醇-水的混合溶液。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，步骤4)中，反复洗脱用的乙腈-水或乙醇-水为体积比20:80的乙腈-水或体积比为40:60的乙醇-水。