[发明专利]一种积雪草药材及其提取物与制剂的质量检测方法

说明书

本发明涉及一种中药材及其制剂的质量检测方法，具体地说，涉及一种积雪草药材及其提取物与制剂的质量检测方法。本发明的方法采用高效液相色谱分离，通过一测多评技术，以积雪草苷为内标物，建立其与羟基积雪草苷、积雪草苷‑B的相对校正因子，并计算羟基积雪草苷和积雪草苷‑B含量的方法。该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确地评价积雪草药材及其提取物与制剂的质量，可解决因对照品缺乏而无法客观合理地控制药材及其制剂质量的问题，对控制质量和保证疗效具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种中药材及其制剂的质量检测方法，具体地说，涉及一种积雪草药材及其提取物与制剂的质量检测方法。

背景技术

积雪草为伞形科Centella asiatica(L.)Urb.的干燥全草，具有消炎、增强记忆力、促进胶原蛋白合成和抗癌等多种生理活性，目前认为，三萜皂苷类物质是积雪草的活性成分，主要包括积雪草苷(madecassoside)、羟基积雪草苷(asiaticoside)、以及积雪草苷-B(asiaticoside–B)三种化合物，其结构式如下所示，由于积雪草苷-B为羟基积雪草苷的同分异构体，分离制备大量高纯度的对照品难度较大，直接限制了用常规的外标或内标法来实现其多指标的质量控制，无法全面控制药材质量。

对于积雪草总苷中有关成分的HPLC含量测定已有相关报道，均是在一般的HPLC条件下进行测定，而一般的甲醇-水或乙腈-水系统的流动相均无法有效分离羟基积雪草苷与其同分异构体积雪草苷B。

“一测多评”是一种适合中药特点的多指标质量评价的新模式，它利用有效化学成分间内在的函数和比例关系，只测定1个成分(对照品可得到者)来实现对多个成分(对照品没有或难以得到者)的同步监控，克服对照品短缺这一问题，即只测定某个代表性成分(易得、廉价、有效)，同时可计算出其他待测有效成分的含量。

“积雪草总苷及其制剂的含量研究.Ⅱ.积雪草总苷中积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B含量的HPLC法测定”【陈云艳，邵燕，等.积雪草总苷及其制剂的含量研究.Ⅱ.积雪草总苷中积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷-B含量的HPLC法测定[J].中国医药工业杂志，2010，41(4)：276-279】以β-环糊精作为流动相添加剂，建立了HPLC法测定积雪草总苷原料中积雪草苷、羟基积雪草苷及同分异构体积雪草苷-B的含量。然而该方法是用来测定积雪草总苷中三种三萜皂苷类成分，而积雪草总苷是积雪草经过提取后再经过纯化工艺的成品，按照中国药典2010年版和2015年版的要求，其所含的羟基积雪草苷和积雪草苷的含量不得低于55％，可见，积雪草总苷中所含的物质成分复杂程度明显不及积雪草、积雪草提取物及其制剂。而且上述方法需要使用3种对照品，其中积雪草苷-B的对照品难以获得、分析成本过高等原因，限制了外标法进行多指标成分质量控制的实际应用。

因此，为了控制好积雪草药材及其提取物与制剂的临床安全性，维护患者的利益，很有必要在现有技术的基础上研究设计出能准确检测多种有效成分的检测方法。

有鉴于此特提出本发明。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，采用高效液相色谱分离，通过一测多评技术，以积雪草苷为内标物，建立其与羟基积雪草苷、积雪草苷-B的相对校正因子，并计算羟基积雪草苷和积雪草苷-B含量的方法。该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确地评价积雪草药材及其提取物与制剂的质量，可解决因对照品缺乏而无法客观合理地控制药材及其制剂质量的问题，对控制质量和保证疗效具有重要意义。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种积雪草药材及其提取物与制剂的质量检测方法，其中，所述的方法包括如下步骤：

(1)积雪草苷对照品溶液的制备