[发明专利]人叶酸代谢相关的三个SNP位点基因分型的PCR扩增系统和检测试剂盒

权利要求书

1.一种人叶酸代谢相关的三个SNP位点基因分型的PCR扩增系统，其特征在于，所述三个SNP位点分别为：rs1801133、rs1801131、rs1801394；同时包含三个样本分子标签位点：Amelogenin、rs57863450、rs35134728；上述6个基因位点在同一PCR扩增体系相互兼容，同时扩增；6个基因位点相应的PCR扩增引物及其荧光标记如下：

第一个位点rs1801133：相应的PCR扩增引物寡核苷酸序列依次为SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2、SEQ ID No.3；FAM荧光素标记SEQ ID No.3；

第二个位点rs1801131：相应的PCR扩增引物寡核苷酸序列依次为SEQ ID No.4、SEQ IDNo.5、SEQ ID No.6；FAM荧光素标记SEQ ID No.6；

第三个位点rs1801394：相应的PCR扩增引物寡核苷酸序列依次为SEQ ID No.7、SEQ IDNo.8、SEQ ID No.9；FAM荧光素标记SEQ ID No.9；

第四个位点Amelogenin：相应的PCR扩增引物寡核苷酸序列依次为SEQ ID No.10、SEQID No.11；FAM荧光素标记SEQ ID No.11；

第五个位点rs57863450：相应的PCR扩增引物寡核苷酸序列依次为SEQ ID No.12、SEQID No.13；FAM荧光素标记SEQ ID No.12；

第六个位点rs35134728：相应的PCR扩增引物寡核苷酸序列依次为SEQ ID No.14、SEQID No.15；FAM荧光素标记SEQ ID No.14。

2.如权利要求1所述的PCR扩增系统，其特征在于，SEQ ID No.1-SEQ ID No.15所示寡核苷酸PCR扩增引物的工作浓度为50〜300nmol/L。

3.如权利要求1所述的PCR扩增系统，其特征在于，引物组合物由SEQ ID No.1-SEQ IDNo15所示寡核苷酸序列的PCR引物的干粉或溶液组成。

4.一种如权利要求1所述的PCR扩增系统在制备用于检测人叶酸代谢相关的三个SNP位点基因分型的试剂盒中的应用。

5.一种人叶酸代谢相关的三个SNP位点基因分型检测试剂盒，所述三个SNP位点分别为：rs1801133、rs1801131、rs1801394；同时包含三个样本分子标签位点：Amelogenin、rs57863450、rs35134728；其特征在于，包含引物组合物容器、PCR反应母液容器、PCR辅助液容器；其中：

所述引物组合物容器包含引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.15组合物贮存液，贮存液浓度为相应工作浓度的2~10倍；这里，SEQ ID No.1-SEQ ID No.15所示寡核苷酸PCR扩增引物的工作浓度为50〜300nmol/L；

所述PCR反应母液容器内有进行PCR反应的2~5倍反应浓度的PCR反应母液，PCR反应母液包含：DNA聚合酶0.5~5U 、镁离子1~5mmol/L、dNTP 40～400μmol/L以及Tris-HCl缓冲液20~100mmol/L；

所述PCR辅助液容器内有可使所述PCR以干血滤纸片为扩增模板进行相应位点基因分型的缓冲体系，该缓冲体系以PBS为基液，包含浓度为1~2M的甜菜碱、浓度为10~30mM的(NH₄)₂SO₄，以及浓度为2%~8%的DMSO。