[发明专利]一种用于油气微生物勘探烃氧化菌检测的土壤样品的预处理方法

说明书

本发明涉及微生物检测技术领域，本发明提供了一种用于油气微生物勘探烃氧化菌检测的土壤样品的预处理方法，包括以下步骤：1)将在野外采集的土壤置于开口透气容器中，密封容器开口；2)对步骤1)密封后的透气容器进行恒温鼓风，使其中的土壤干燥。试验结果显示，使用本发明所述方法预处理之后的土壤进行烃氧化菌的检测，其结果和常规冷冻方法的结果类似。本发明干燥之后的土壤经过两周的常温放置，之后再进行检测，其结果和刚刚干燥的样品类似。以上结果说明，本发明所述方法作为常规冷冻保存的替代方法，在油气微生物勘探中对烃氧化菌的研究中，具有较高的适用性。

技术领域

本发明涉及土壤微生物检测技术领域，尤其涉及一种用于油气微生物勘探烃氧化菌检测的土壤样品的预处理方法。

背景技术

目前，用于环境土壤微生物检测的样品保存方法主要是现场采集后迅速低温冷冻，或者保持在1-5℃保存，即在野外现场取一定量的土壤样品密封后，使用冰箱、液氮、冰袋或者干冰等方法进行冷冻或者保持1-5℃，运输的全程也需要保持冷冻或者低温的状态。利用保存的土壤样品检测微生物，所获得的微生物信息对农业、环保和油气勘探等领域有重要意义。

其中，油气微生物勘探技术的微生物学基础是细菌对不同营养源异常高的适应性及广泛分布。通过测量烃类氧化菌的生物化学特性以及群体分布出现特征，来进行油气微生物勘探。烃氧化菌是一类能够代谢利用烃类的微生物的总称。研究表明，常见的烃氧化菌有链霉菌、假单胞菌、红球菌和糖丝菌等。这种微生物只要是在有持续轻烃气流的地方就可以利用极低的轻烃气聚集，而且仅在含烃构造之上地表之下富集。采用合适的微生物技术，检测出微生物异常，就可以精确预测下伏油气藏的存在及其油气藏的性质。

然而，在油气微生物勘探中对烃氧化菌进行研究时，采用上述冷冻或低温法对土壤样品预处理，该方法存在以下问题：

1)对温度要求严格。冷冻或低温保存必须保证样品从采集到运输的全程均需要严格的低温过程，而在野外施工中常常难以保证低温。

2)运输困难。使用冰箱、液氮、冰袋或者干冰等方法保存的冷冻或者低温样品，从野外运输到实验室的过程实现起来比较困难，成本高，样品升温的风险大。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种用于油气微生物勘探烃氧化菌检测的土壤样品的预处理方法，本申请提供的预处理方法简单、有效，成本低，可用于油气微生物勘探烃氧化菌检测，尤其便于土壤样品长时间长途运输。

本发明提供一种用于油气微生物勘探烃氧化菌检测的土壤样品的预处理方法，包括以下步骤：

1)将在野外采集的土壤置于开口透气容器中，密封容器开口；

2)对步骤1)密封后的透气容器进行恒温鼓风，使其中的土壤干燥。

优选地，所述恒温鼓风的温度为25～50℃。

优选地，所述恒温鼓风的温度为30～38℃。

优选地，所述恒温鼓风的时间为1～72小时。

优选地，所述恒温鼓风的时间为3～24小时。

优选地，所述开口透气容器为牛皮纸袋。

优选地，所述恒温鼓风的方式为单独鼓风单独恒温或者恒温和鼓风同时使用。

优选地，还包括：

3)将步骤2)干燥后的样品常温保存。

干燥脱水属于微生物保存保藏方法，如沙土管保藏法。沙土管保藏法适用于产孢子类放线菌、芽孢杆菌、曲霉属、青霉属及少数酵母，保藏时间约为2-10年不等。但是，沙土管保藏法应用于营养细胞则效果不佳。由于干燥脱水处理会使得一部分微生物死亡，且对于营养细胞的保存效果不佳，所以还没有用于土壤微生物学研究，特别是油气微生物勘探中对于烃氧化菌的研究中作为样品预处理的一种方法。