[发明专利]一株具有强抗氧化性的草酸青霉菌SY‑15及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株具有强抗氧化性的草酸青霉菌及其应用，主要应用于抗氧化剂的研究。

背景技术

抗氧化(Anti-Oxidant)是对抗氧化自由基的简称，而且自由基学说也很好地解释了抗氧化作用，自由基学说指出自由基是具有高度的化学的活性，如果生物体内自由基过多，就会导致组织器官和细胞的损伤，从而诱发各种疾病、加速机体衰老，最终会导致疾病的发生。

抗氧化剂可以阻止人体自由基从细胞或者其他组织夺取氧原子，可以防止自由基对正常的细胞组织的破坏，它具有抑制炎症的发生、促进生长、抗衰老、减少癌症和心血管疾病等风险的作用。有研究证明，人体的抗氧化系统是一个可以与免疫系统相比的、具有完善和复杂功能的系统，机体的抗氧化的能力越强，就会越健康，生命也就会越长。而且抗氧化剂还可以应用于很多领域，比如食品保鲜，化妆品行业等，特别是生物抗氧化剂副作用少，污染小。

多酚类物质的生物学活性具有广谱性。近年来的研究表明，多酚类物质具有很明显的调节糖脂代谢、抗菌、抗氧化、抗癌、抗病毒、治疗口腔溃疡与牙周疾病、抑制心血管疾病等活性，这一切的根源可能是因为它是一类良好的天然的抗氧化剂。多酚类化合物中含有的酚性羟基是良好的中子或氢的给与体，这对生物组织膜由于发生氧化作用而生成的会引起结构、功能损伤的羟自由基(·OH)、过氧自由基(·OOH)等自由基具有良好的清除作用，因此能够阻止人体自由基从细胞或者其他组织中夺取氧原子，同时也防止自由基对正常细胞、组织造成伤害，从而抑制了炎症的发生、促进生长发育、延缓衰老、减少心血管疾病的发生和降低癌症的风险。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15菌株，该草酸青霉菌具有很强的抗氧化作用，而且其发酵液酚酸含量也比较高，可用于制备抗氧化剂，为开发新的抗氧化剂提供了新选择。

所述草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15是从疏花水柏枝(MyricariaLaxiflora)的叶中获得的内生真菌，于2017年1月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为，CCTCCM：2017025。保藏地址为中国，武汉，武汉大学。

本发明草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15在马铃薯葡萄糖培养基上具有以下微生物学特性：刚开始有白色菌丝，逐渐的白色菌丝产绿色孢子，最后基本都是绿色的孢子，看不到菌丝，孢子表面较干燥。

本发明目的是提供一种用于抗氧化剂的研究，其活性成分为草酸青霉菌SY-15。抗氧化试验表明，DPPH自由基清除率为86.48％，总抗氧化为11.64单位/mL，发酵液中多酚类物质的含量为10.75mg/mL。因而，本发明还包括含有所述菌株或者其发酵液的生物农药，以及含有所述菌株的微生物菌剂。

本发明以草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15菌株为模板，使用通用上游引物ITS1：5′-TCC GTAGGT GAA CCT GCG G-3′和通用下游引物ITS4：5′-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-3′进行PCR扩增获得750bp的18s rDNA部分序列。通过Blast与GenBank收录的序列进行比对，发现SY-15与草酸青霉菌的同源性为99％。用MEGA4.1进化树(图4)，鉴定菌株(SY-15)与一株草酸青霉菌(Penicillium oxalicum KF768466)的同源性达99％。

附图说明

图1为本发明的草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15的菌落形态，左图为正面、右图为背面。

图2为本发明的草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15的显微形态。

图3为本发明中不同浓度H2O2下大肠杆菌细胞的存活率。

图4为四种提取物对大肠杆菌的氧化损伤保护作用。

图5为没食子酸标准曲线。

图6为本发明的草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15菌株的18S rDNA系统发育树。

具体实施方式

实施例一：草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)SY-15的分离和保存

2012年在三峡流域湖北宜昌境内胭脂坝采集疏花水柏枝叶片，消毒后直接进行分离纯化即可获得；