[发明专利]一种臭椿树初始芽的获取方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，尤其是涉及一种一种臭椿树初始芽的获取方法。

背景技术

臭椿树(Ailanthus altissima（Mill.）Swingle),苦木科（Simaroubaceae）臭椿属植物，落叶乔木，高可达20余米，树皮平滑而有直纹；嫩枝有髓，幼时被黄色或黄褐色柔毛，后脱落。喜光，能适应广泛气候条件，耐-30 ℃低温；耐干旱贫瘠，适应性强，除黏土外，各种土壤和中性、酸性及碱性土都能生长，适生于深厚、肥沃、湿润的沙质土壤。耐寒，耐旱，不耐水湿，长期积水会烂根死亡,深根性。对烟尘与二氧化硫的抗性较强，病虫害较少,具有良好的抗污能力和抗病虫害能力。我国除黑龙江、吉林、新疆、青海、宁夏、甘肃和海南外，各地均有分布。世界各地广为栽培。因它具有较强的抗烟能力，所以是工矿区绿化的良好树种。又因它适应性强、萌蘗力强，故为山地造林的先锋树种，也是盐碱地的水土保持和土壤改良用树种。 木材黄白色，可制作农具车辆等；叶可饲椿蚕（天蚕）；树皮、根皮、果实均可入药，有清热利湿、收敛止痢等效。组织培养能通过无性繁殖，遗传树种的优良特性，能在短时间内快速繁殖获得大量优质的组培苗，为优质种源推广提供可能。

发明内容

本发明针对现有臭椿树组织培养中外植体消毒困难、褐化、初始芽发生率低、芽苗活性差等的技术问题，提供一种臭椿树无菌外植体制备及初始芽诱导的方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下

一种一种臭椿树初始芽的获取方法，包括外植体准备、外植体消毒处理以及初始芽诱导工序，采集臭椿树当年生嫩枝作为外植体，进行消毒处理后，获得的无菌外植体接种于初始芽诱导培养基中，在适宜环境中培养20-30天后，获得生长快、活力旺盛的臭椿树初始芽，其操作步骤如下：

（1）外植体准备：

在至少连续3天晴朗的气候里，采集臭椿树的树冠外围生长健壮的当年生嫩枝作为外植体；

（2）外植体消毒处理：

将外植体用无菌水冲洗干净后，置于体积浓度为0.1-0.3 %的广谱杀菌剂中浸泡20-30 min，取出外植体将其置于体积浓度为70 %酒精中浸泡1-2 min，再移入体积浓度为5-8 %的次氯酸钠溶液中浸泡10-20 min，取出放于体积浓度为10-25 %的双氧水和2-5滴吐温的混合液中搅拌浸泡20-30 min后，最后用无菌水洗3-4次，每次冲洗3-5 min；将外植体裁成带至少1个腋芽，1.5-3cm长的茎段，视茎段木质化程度分类置放容器内，备用；

将步骤（2）得到的外植体接种于诱导培养基中；所述的诱导培养基为：改良1/2MS培养基 + NAA0.5-2.0 mg·L^-1 + MT 1.0-3.0 mg·L^-1 + 6-BA 1.0-3.0 mg·L^-1 + 葡萄糖30 g·L^-1 + 琼脂3.5 g·L^-1 + 0.1-0.3 %广谱杀菌剂；初始芽诱导培养周期为：20-30天，置于温度：20±3℃，光照培养时间为：16 h，光照强度为：≤1000 lx的环境中进行初始芽诱导培养，获得生长健壮、活力旺盛的臭椿树初始芽。初始芽萌动率在90%以上。