[发明专利]一种对细菌、植物病原真菌和肿瘤细胞具有抑制活性的化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明提供了一种对细菌、植物病原真菌和肿瘤细胞具有抑制活性的化合物，同时提供了该化合物的制备方法。

背景技术

链霉菌IIR21菌株是从湖北省神农架地区分离获得，对稻瘟菌NO-1菌株(Magnaporthe grisea NO-1)、稻瘟菌168菌株(Magnaporthe grisea 168)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、腐霉菌(Botrytis cinerea)、禾谷镰刀菌(Fusarium aminearum)、黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)、棉花黄萎菌(Verticillium dahliaekleb)具有一定的抑菌活性。

从链霉菌ⅡR21菌株发酵液中分离纯化出具有生物活性的化合物，是利用并开发链霉菌ⅡR21菌株的次级代谢产物的前提。通过前期研究，确定了链霉菌ⅡR21菌株发酵液中有效抑菌活性成分主要集中在中等极性的乙酸乙酯部位。随后发酵了5L发酵液进行乙酸乙酯萃取，并通过薄层层析确定了硅胶柱层析洗脱体系：石油醚:氯仿，氯仿:甲醇；通过硅胶柱层析对乙酸乙酯粗提物的初步分离，最终获得了F1、F2和F3三个活性较好的组分，活性组分的抑菌圈直分别为21.26mm，47.28mm，30.78mm；随后，对活性组分，采用制备型高效液相进行了纯化。

遗憾的是，由于微生物次级代谢产物的产量本来就很少，由于链霉菌的次级代谢产物中具有生物活性化合物纯品的含量很低，一般仅能达到0.1％～0.2％左右或更低，对于抗真菌活性相对较好的F2组分，F2组分经分析型高效液相分析后，发现其成分复杂，因此无法获得F2组分里的活性化合物单体。

发明内容

本发明解决了背景技术中的不足，提供了一种从链霉菌ⅡR21菌株发酵液中提取分离出一个化合物单体，该单体具有36元环多羟基大环内酯类化合物，侧链中含有三个脱氧糖和1,4-萘醌，该化合物单体对细菌、植物病原真菌和肿瘤细胞都有较好的抑制活性。

实现本发明上述目的所采用的技术方案为：

一种对细菌、植物病原真菌和肿瘤细胞具有抑制活性的化合物，所述化合物的结构式如下：

，其中R为OH或H。

本发明还提供了上述化合物的制备方法，包括以下步骤：(1)、将链霉菌IIR21菌株接入种子培养基中，在28℃条件下，培养72h，得到种子液；

所述种子培养基由以下组分组成，各组分以及各组分所占的质量百分比为：葡萄糖0.1％，可溶性淀粉2.4％，大豆蛋白胨0.3％，酵母提取物0.5％，胰蛋白胨0.5％，豆粉0.5％，氯化钠0.54％，氯化钾0.02％，氯化镁0.24％，硫酸钠0.75％，碳酸钙0.4％，水余量；

(2)、将体积浓度为5％的种子液转接入200升发酵罐中，在28℃条件下培养，在不同培养时间测定发酵液的生物活性，当生物活性最大时，收集得到发酵液；

所述发酵培养基由以下组分组成，各组分以及各组分所占的质量百分比为：酵母提取物0.5％，大豆蛋白胨0.1％，葡萄糖0.5％，豆粉0.3％，糖酸2％，氯化钠0.53％，氯化钾0.02％，六水氯化镁0.24％，硫酸钠0.75％，四水硫酸锰0.00076％，六水氯化钴0.0001％，磷酸氢二钾0.05％，碳酸钙0.4％，水余量；

(3)、将发酵液经分离纯化获得多个单体化合物，所述分离纯化方法为浓缩、萃取、硅胶柱层析和高效液相色谱；

(4)、对分离获得的单体化合物进行细菌、植物病原真菌和肿瘤细胞的抑制活性的检测，获得一个对细菌、植物病原真菌和肿瘤细胞具有抑制活性的化合物。

(5)、通过质谱仪、¹H和¹³C核磁共振对上述单体化合物进行结构鉴定，鉴定出出该化合物的结构式如上式所示，即可制得目标产物。

该化合物能够用于制备抑制细菌、植物病原真菌及肿瘤细胞活性的药物中。所述的细菌包括藤黄微球菌；所述的真菌包括立枯丝核病菌、稻瘟病菌NO-1菌株、稻瘟病菌168菌株、腐霉病菌、黄色镰刀病菌、禾谷镰刀病菌、酿酒酵母、白色念珠菌；所述的肿瘤细胞包括人肺癌细胞、人乳腺癌细胞和结肠癌细胞。