[发明专利]一种ACPA阴性的RA诊断标志物及其应用

说明书

本发明提供脱氧辅蛋白双加氧酶，即DOHH或其片段在制备用于诊断抗瓜氨酸多肽抗体阴性的类风湿性关节炎疾病的试剂中的用途。本发明通过高密度蛋白质芯片与RA血清杂交筛选到35种蛋白质为候选ACPA阴性RA自身抗原，鉴定到4种蛋白质抗原在RA的ACPA阴性的血清中具有较高的灵敏度和特异度，均为新发现的自身抗原，它们是DOHH,DUSP11,PTX3,PAGE5，表明DOHH,DUSP11,PTX3,PAGE5可作为ACPA阴性的RA诊断标志物。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种ACPA阴性的RA诊断标志物及其应用。

背景技术

类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性的自身免疫性疾病，主要是以引起全身多处小关节局部滑膜的炎症反应，进而造成关节局部的骨质破坏为一组临床表现的疾病。在发展中国家，类风湿性关节炎影响了近0.5％-1％左右的人群。总体来说，RA在女性中的发病率要高于男性，在老年人中的发病率要高于年轻人。类风湿性关节炎的临床表现差异很大，可以是轻微症状的自限性疾病，也可以是快速进展的炎症伴关节破坏及严重身体残疾。由于疾病表现的差异性，人们制定了分类标准作为疾病定义、标准化临床试验入选人群选择以及多中心研究比较的基础。因此1987诞生了由年美国风湿病学会(ACR)制定的RA的分类标准。但在实际应用过程中，由于该分类标准对于关节炎的定义要求严格，致使它对于RA诊断的敏感性不高，有相当一部分早期的RA并没有从中被识别出来。但同时，尤为重要的是新发RA病例有可能从早期的有效干预中获益，以避免进展为慢性、侵蚀状态RA，进一步导致残疾，影响长期生活质量，增加疾病死亡率。因此，对于类风湿性关节炎来说，早期的诊断和治疗是阻止不可逆性关节破坏的关键。于是2009年，ACR/EULAR标准更新，该标准诊断RA的敏感性较高，能够在疾病早期诊断RA并进行治疗，缺点是特异性较差。

在2009年最新的RA的分类标准中，血清中ACPA(抗瓜氨酸多肽抗体)的阳性被纳入诊断标准。这一抗瓜氨酸化的蛋白抗体被认为是类风湿性关节炎的血清特异性的标志物，它的出现也增加了我们对RA发病机制的理解。但是直至现在，RA的确切病因仍然未知，环境因素和遗传因素被公认为是引起RA临床症状的“扳机”。同时，临床上也存在着一类ACPA抗体阴性的RA患者，并且随着研究者对疾病的认识不断加深，他们逐渐认识到ACPA抗体阳性的RA患者和ACPA抗体阴性的RA患者存在一定的临床异质性。但是由于目前临床上对于ACPA抗体阴性的RA患者缺乏特异性的生物标志物，这使得这类患者的诊断难度大大增加。

RA患者的血清中发现自身抗体已经超过70年。类风湿因子以人类IgG的Fc片段为靶点，是发现的第一组自身抗体，包括IgG和IgM等各类亚型。遗憾的是RF并不是针对RA的特异性抗体，在其他自身免疫病和高龄人群中也会有RF的出现。更重要的是，在高达15％的健康人群中也可以检测到RF。随着研究的深入，1964年和1979年，人们分别发现了RA患者中存在的其它抗体，即抗核周因子抗体(APF)和抗角蛋白抗体(AKA)。尽管这两种抗体对诊断RA的特异性很高，但这些自身抗体很难测到。因此，在日常实践中，RF仍被辅助用于RA的诊断。为此，RF阳性被纳入1987年ACR的RA标准。直到1995年人们才发现抗核周蛋白和抗角蛋白抗体是相同的自身抗体，它们共同的靶点都来自精氨酸残基的去亚胺化所形成的的瓜氨酸残基。于是，2002年通过研发瓜氨酸化肽(CCP)-2技术出现了首个测定ACPA的商业化测试，使ACPA能够作为RA常规检查的生物标志物。对这个独特的自身抗体系统进行深入研究，加深了人们对RA的理解和分类，因此，RF和ACPA都成为ACR/EULAR2010分类标准的一部分。