[发明专利]基于rs737865的检测利培酮用药效果的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及基因技术领域的核酸及其引物和检测方法，具体涉及一种基于rs737865的检测利培酮用药效果的试剂盒。

背景技术

利培酮(Risperidone)分子式为C23H27FN4O2。利培酮为苯并异恶唑衍生物，是新一代的抗精神病药。其活性成份利培酮是一种具有独特性质的选择性单胺能拮抗剂，它与5-羟色胺能的5-HT2受体和多巴胺的D2受体有很高的亲和力。利培酮也能与肾上腺素能受体结合，并且以较低的亲和力与H1-组胺能受体和α2-肾上腺素受体结合。利培酮不与胆碱能受体结合。利培酮是强有力的D2拮抗剂，可以改善精神分裂症的阳性症状，但它引起的运动功能抑制，以及强直性昏厥都要比经典的抗精神病药少。对中枢系统的5-羟色胺和多巴胺拮抗作用的平衡可以减少发生锥体外系副作用的可能，并将其治疗作用扩展到精神分裂症的阴性症状和情感症状。研究表明，利培酮的药效和药物副作用有明显的个体差异，原因是其代谢受到遗传因素及环境因素的影响，但遗传因素是最主要的原因。因此开发更多的与利培酮代谢相关的分子标记物从而对患者实现个体化治疗是非常有必要的。

COMT(Catechol-O-methyltransferase)基因位于人类第22号染色体q11.21上，在不同的细胞中被翻译成不同长度的蛋白。在大脑的神经细胞中，COMT基因表达为膜结合的儿茶酚-O-甲基转移酶蛋白；大脑中的儿茶酚-O-甲基转移酶蛋白主要分布在前额叶皮质区，它可以保证神经递质如多巴胺等在一个稳定的水平上。在肝、肾及血液等器官中表达为可溶性的儿茶酚-O-甲基转移酶蛋白，它可以催化甲基从S-腺苷甲硫氨酸转移到儿茶酚胺上，此类物质包括神经递质多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素等。COMT基因在代谢治疗高血压、哮喘、帕金森疾病的儿茶酚药物方面起着重要的作用。由于利培酮与多巴胺、5-羟色胺等多种神经递质受体均有相互作用，因此寻找利培酮代谢与COMT基因多态性的关系是现有技术急需解决的难题。

对现有文献的检索，未发现有本发明的COMT基因SNP rs737865为利培酮分子标记物的相关报道。现有的利培酮分子标记研究多基于欧美人群，不能在中国汉族人群中应用。而且由于精神分裂病人利培酮单药治疗后符合标准的病人较少，样本收集十分困难，现有研究由于样本量小，不具有相应的代表性。而本发明通过扩大样本量在中国汉族人群中进行大规模发掘和验证，发现了COMT基因SNP rs737865可以作为利培酮分子标记物，具有明显的经济效益。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种基于rs737865的检测利培酮用药效果的试剂盒；具体地讲是一种分离核酸、一种等位基因特异性的核酸引物和COMT基因SNP rs737865单核苷酸多态性的检测方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

第一方面，本发明提供了一种分离的含单核苷酸多态性位点的核苷酸，所述核苷酸的序列如SEQ ID NO：1所示，所述单核苷酸多态性位点位于第858位，rs737865为A→G。

第二方面，本发明提供了一种如前述的核苷酸在制备检测利培酮用药效果的试剂盒中的用途。

优选的，SNP rs737865为利培酮分子标记物。

第三方面，本发明提供了一种分离的核苷酸，所述核苷酸的序列如SEQ ID NO：1所示第858位，该位点为A。

第四方面，本发明提供了一种检测利培酮用药效果的试剂盒，所述试剂盒包括：根据如SEQ ID NO：1所示序列的第858位的上下游设计的引物对。

作为优选方案，所述引物对为野生型引物对或突变型引物对，其中，所述野生型引物对的序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示：

正向引物：5′-acaatAAAAAGCAACAGGACACAAAAAaCC-3′SEQ ID NO：3

反向引物：5′-TGCTGTGATGAGGGGCTCCAGATAG-3′SEQ ID NO：4；

所述突变型引物对的序列如SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：4所示：

正向引物：5′-AAAAAGCAACAGGACACAAAAAgCC-3′SEQ ID NO：5

反向引物：5′-TGCTGTGATGAGGGGCTCCAGATAG-3′SEQ ID NO：4。

第五方面，本发明提供了一种如前述的试剂盒的非诊断目的使用方法，其包括如下步骤：

S1，提取样品DNA；

S2，利用所述引物对进行扩增，得扩增产物；