[发明专利]一种分离高纯度尿液外泌体的方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201710082704.1 | 申请日： | 2017-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN106929467B | 公开（公告）日： | 2021-05-18 |
| 发明（设计）人： | 崔大祥;杨蒙;郅晓;刘岩磊 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 分离 纯度 尿液 外泌体 方法 试剂盒 | ||
【权利要求书】：
1.一种分离高纯度尿液外泌体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、尿液样品离心，弃沉淀，收集上清液；
步骤二、将步骤一得到的上清液用滤头过滤，收集过滤液；
步骤三、将步骤二得到的过滤液装入透析袋中透析得到外泌体；
其中，所述步骤三中用到的透析袋的规格为300kDa和/或所述透析袋的孔径是25nm～30nm；
所述步骤三中透析液为PBS或0.9％生理盐水，透析时间9小时且每3小时更换一次新鲜的透析液；
步骤四、将步骤三中获得的外泌体在超滤管中超滤最终得到浓缩的尿液外泌体。
2.根据权利要求1所述的分离高纯度尿液外泌体的方法，其特征在于，所述步骤一中离心的时间为5min，转速是3000rpm。
3.根据权利要求1所述的分离高纯度尿液外泌体的方法，其特征在于，所述步骤二中过滤上清液的滤头的规格为0.22微米。
4.根据权利要求1所述的分离高纯度尿液外泌体的方法，其特征在于，所述步骤四中用到的超滤管的规格为100kDa～200kDa，超滤条件为3000rpm，5min。
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