[发明专利]一种肠γδT细胞的分离方法在审
| 申请号： | 201710084479.5 | 申请日： | 2017-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN106754707A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 杨辉 | 申请（专利权）人： | 南京市儿童医院 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 210000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 分离 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种肠γδT细胞的分离方法,其特征在于，包括以下步骤：
1)、收集动物的肠淋巴细胞，离心，去掉上清液，生理盐水悬浮肠淋巴细胞；
2)、用荧光标记的抗γδTCR抗体标记收集到的肠淋巴细胞，然后加入抗荧光微珠标记的抗FITC单克隆抗体，然后上磁式细胞分选仪优化分选，收集阳性选择的细胞，即得到γδT细胞。
2.如权利要求1所述的肠γδT细胞的分离方法,其特征在于，所述步骤1)中采用肠系膜淋巴管插管法收集动物的肠淋巴细胞。
3.如权利要求2所述的肠γδT细胞的分离方法,其特征在于，所述步骤2)中采用异硫氰酸荧光素交联的抗γδTCR单克隆抗体标记收集到的肠淋巴细胞，每l×108个肠淋巴细胞加100μl异硫氰酸荧光素交联的抗γδTCR单克隆抗体，4℃孵育30分钟，用缓冲液洗2次。
4.如权利要求2所述的肠γδT细胞的分离方法,其特征在于，所述步骤2)中每l×108个肠淋巴细胞加100μl抗荧光微珠标记的抗FITC单克隆抗体，4℃孵育15分钟，用缓冲液洗1次。
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