[发明专利]抗PD-1的纳米抗体PD-1/Nb20及其制备方法与应用

权利要求书

1.纳米抗体，包含决定簇互补区；其特征在于：

所述纳米抗体的决定簇互补区由CDR1、CDR2和CDR3组成；

所述CDR1的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.8的第26-35位氨基酸；

所述CDR2的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.8的第52-60位氨基酸；

所述CDR3的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.8的第98-114位氨基酸；

所述纳米抗体的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.8所示。

2.与权利要求1所述纳米抗体相关的生物材料，为B1）至B12）中的任一种：

B1）编码权利要求1所述纳米抗体的核酸分子；

B2）含有B1）所述核酸分子的表达盒；

B3）含有B1）所述核酸分子的重组载体；

B4）含有B2）所述表达盒的重组载体；

B5）含有B1）所述核酸分子的重组微生物；

B6）含有B2）所述表达盒的重组微生物；

B7）含有B3）所述重组载体的重组微生物；

B8）含有B4）所述重组载体的重组微生物；

B9）含有B1）所述核酸分子的转基因动物细胞系；

B10）含有B2）所述表达盒的转基因动物细胞系；

B11）含有B3）所述重组载体的转基因动物细胞系；

B12）含有B4）所述重组载体的转基因动物细胞系。

3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：B1）所述核酸分子为下述1）或2）或3）：

1）核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.9的cDNA分子或DNA分子；

2）与1）限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性，且编码权利要求1所述纳米抗体的cDNA分子或基因组DNA分子；

3）在严格条件下与1）限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述纳米抗体的cDNA分子或基因组DNA分子。

4.权利要求1所述纳米抗体的衍生抗体，为下述a）或b）或c）或d）或e）或f）：

a）含有权利要求1所述纳米抗体的单链抗体；

b）含有a）所述单链抗体的融合抗体；

c）含有权利要求1所述纳米抗体的融合抗体；

d）含有权利要求1所述纳米抗体的Fab；

e）含有权利要求1所述纳米抗体的完整抗体；

f）含有权利要求1所述纳米抗体的复合物。

5.权利要求1所述纳米抗体的制备方法，包括将编码权利要求1所述纳米抗体的核酸分子导入受体细胞得到表达所述纳米抗体的转基因细胞，培养所述转基因细胞，得到所述纳米抗体；

所述编码权利要求1所述纳米抗体的核酸分子的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.9所示。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述受体细胞为微生物细胞。

7.下述A1-A4中的任一种用途：

A1、权利要求1所述纳米抗体在制备肿瘤抑制剂或肿瘤细胞抑制剂中的应用；

A2、权利要求2-3中任一所述生物材料在制备肿瘤抑制剂或肿瘤细胞抑制剂中的应用；

A3、权利要求4所述衍生抗体在制备肿瘤抑制剂或肿瘤细胞抑制剂中的应用；

A4、权利要求5所述方法在制备肿瘤抑制剂或肿瘤细胞抑制剂中的应用。