[发明专利]B淋巴瘤和白血病的检测标记物、试剂盒及其应用

说明书

本发明属医药技术领域，具体为B淋巴瘤和白血病的检测标记物、试剂盒及其应用。本发明提供P4HA2基因或蛋白和Carabin蛋白在制备诊断试剂或治疗B淋巴瘤和白血病的用途。研究表明，P4HA2基因和蛋白在正常人或反应增生淋巴结中几乎不表达或低表达，而在弥散性大B淋巴瘤中显著高表达；而Carabin蛋白在弥散性大B淋巴瘤中低表达。另外，P4HA2基因在急性髓性白血病血液样本中的表达量显著高于正常人；敲低P4HA2表达的弥散性大B淋巴瘤细胞株增殖减慢，裸鼠成瘤能力显著降低；因此，P4HA2可作为这类造血及淋巴肿瘤的诊断标记物及治疗靶标，而Carabin也可作为该类疾病的诊断标记物。本发明还提供相应的检测方法和试剂盒。

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及B淋巴瘤或白血病的检测标记物、试剂盒及其在制备抗肿瘤药物的用途。

背景技术

哺乳动物细胞中催化脯氨酸残基的是脯氨酰-4-羟化酶（P4H），产生(2S,4R)-4-羟基脯氨酸。脯氨酰-4-羟化酶具有广泛的底物，其中最为重要的是催化新合成的胶原蛋白前体，对其折叠形成正确的三维构象是关键且必要的。底物哺乳动物的脯氨酰-4-羟化酶是一个α₂β₂的四聚体，其α亚基具有底物结合结构域和酶活位点。α亚基具有3种亚型，一型亚基(prolyl 4-hydroxylase, alpha polypeptide Ⅰ,简称为“P4HA1”)是表达最为广谱的酶。脯氨酰-4-羟化酶二型α亚基(prolyl 4-hydroxylase, alpha polypeptide II,简称为“P4HA2”)，由535个氨基酸组成，在某些特异组织表达。P4ha1^-/-基因敲除小鼠胚胎致死，但P4ha1^+/-或P4ha2^-/-基因敲除的小鼠没有观察到明显异常的表型，并且敲除P4ha1^+/-和P4ha2^-/-的小鼠软骨发育不良。近来研究表明，P4HA2基因（而非P4HA1）的异常与疾病紧密相关，该基因的突变伴随着非综合征性高度近视疾病，且P4HA2基因的一个内含子区域在中国吸烟人群中是肺癌易感位点。除此而外，有报道指出P4HA1和P4HA2在乳腺癌中高表达，并通过调节胶原蛋白的构象参与乳腺癌恶性转移。但是，未见P4HA1和P4HA2与弥散性大B淋巴瘤或白血病相关的报道。

Carabin是TBC1蛋白家族的成员，前期研究表明，Carabin 在脾脏和外周血淋巴细胞中表达，并负调控T细胞抗原受体（T cell antigen receptor TCR）信号通路。进一步研究发现Carabin是钙依赖磷酸酶Calcineurin的内源性抑制因子。除此之外，它还通过其RasGAP活性抑制Ras信号通路。Carabin对Calcineurin和Ras通路的调控是因为通过直接与Ras以及Calcineurin相互作用而实现的。另外，Carabin还可以通过同样的机制负调控B细胞的BCR信号通路，抑制Carabin的表达可以加快B细胞的早期应答。最近，在敲除Carabin的小鼠中发现Carabin与心肌肥厚有关，也是通过抑制Calcineurin、Ras和Ca2+/钙依赖性蛋白激酶2信号通路防止心肌肥厚。但是，未见文献报导Carabin蛋白在B淋巴瘤中的表达情况及其相关性。