[发明专利]艰难梭菌检测的并联探针、基因芯片、试剂盒与检测方法在审
| 申请号： | 201710087777.X | 申请日： | 2017-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN106868123A | 公开（公告）日： | 2017-06-20 |
| 发明（设计）人： | 李修敏;申友亮;朱同娥 | 申请（专利权）人： | 青岛市胶州中心医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C40B40/06;C12N15/11 |
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| 地址： | 266300*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 艰难 检测 并联 探针 基因芯片 试剂盒 方法 | ||
1.一种艰难梭菌检测并联探针，其特征在于：包括探针1、2、3、4、5，序列分别为SEQ ID NO.1~5。
2.一种艰难梭菌检测基因芯片，其特征在于：包括固体相载体和权利要求1所述的探针组。
3.如权利要求2所述的艰难梭菌检测基因芯片，其特征在于：所述固相载体为氨基修饰的玻璃基片。
4.一种艰难梭菌检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求2或3所述的基因芯片。
5.如权利要求4所述的艰难梭菌检测试剂盒，其特征在于：还包括艰难梭菌靶基因扩增引物对，引物对序列如SEQ ID NO.8、9所示。
6.如权利要求5所述的艰难梭菌检测试剂盒，其特征在于：所述引物对的下游引物的5’端含有CY3荧光染料标记。
7.如权利要求4-6所述的艰难梭菌检测试剂盒，其特征在于：还包括PCR反应体系、杂交缓冲液、洗涤液、艰难梭菌菌液阳性对照样本、人DNA TAE溶液空白对照样本。
8.如权利要求7所述的艰难梭菌检测试剂盒，其特征在于：PCR反应体系包括：50~150ng/μL的扩增模板0.4μL，Premix Taq 5μL，浓度为8~12μM的上、下游引物各0.2μL。
9.一种艰难梭菌的检测方法，其特征在于：使用权利要求4至8任一项所述的艰难梭菌检测试剂盒进行检测，当5个检测探针中的3个及以上探针显示的结果为阳性时可以判断样品感染艰难梭菌；当5个检测探针中低于3个探针显示的检测结果为阳性，无法判断该样品是否感染艰难梭菌，应当使用重复测试或者使用现有其它检测方法进行进一步验证。
10.如权利要求9所述的艰难梭菌的检测方法，其特征在于：PCR扩增反应程序为95℃ 5min；95℃10s、40℃ 30s、72℃90s、30个循环；72℃ 10min。
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