[发明专利]一种基于连续色谱技术同时提取分离甘草酸、甘草总黄酮的方法

权利要求书

1.一种基于连续色谱技术同时提取分离甘草酸、甘草总黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）按甘草粉末：氨醇溶液为1g：6L的比例加入烧杯中，搅拌均匀后，将其倒入渗滤装置中，再按甘草粉末：氨醇溶液为1g:34L的比例向渗滤柱中加入氨醇溶液，设置流入速度为5-10 ml/min，调节流出速度与流入速度一致，收集渗滤液，得甘草提取液；所述氨醇溶液为含0.5%氨水、70%乙醇的氨醇水溶液；

（2）将甘草提取液上样至阴离子交换树脂D941色谱柱上进行吸附，收集上样流出液；再用体积分数为50-90%乙醇溶液洗脱吸附在色谱柱上的少量甘草总黄酮，洗脱流速为10-20ml/min，收集乙醇洗脱液；合并上样流出液与乙醇洗脱液，将合并液旋蒸至溶液中不含有乙醇为止；

（3）再将旋蒸液上样至聚酰胺树脂色谱柱上进行吸附，用旋蒸液6倍体积量的70%乙醇溶液洗脱，收集甘草总黄酮乙醇洗脱液，再旋蒸干燥，得到甘草总黄酮，用芦丁比色法测定其纯度；

（4）再用0.25-0.75mol/L的 NaOH水溶液洗脱吸附在阴离子交换树脂色谱柱上的甘草酸，洗脱流速为5-10 ml/min，收集NaOH洗脱液；用1mol/L稀盐酸调节NaOH洗脱液pH 至7并旋蒸干燥，得到含盐甘草酸粗品；

（5）用纯甲醇溶解含盐甘草酸粗品，过滤除去盐分，收集滤液并旋蒸干燥，得到甘草酸粗品；用冰醋酸将甘草酸粗品重结晶，过滤得到甘草酸，用HPLC法测定其纯度；

该方法采用的生产装置为一个由12支色谱柱组成的在一个逻辑控制阀控制下的连续色谱分离系统，系统内的色谱柱分为四个区，分别为吸附区、甘草总黄酮解析区、甘草酸解析区和树脂再生区，每个区分别对应1个进口、1个出口，该生产装置共4个进口、4个出口；吸附区用于步骤（2）中甘草酸的吸附，甘草总黄酮解析区用于步骤（3）中甘草总黄酮的解析，甘草酸解析区用于步骤（4）中甘草酸的解析，树脂再生区用于阴离子树脂的再生。

2.根据权利要求1所述的一种基于连续色谱技术同时提取分离甘草酸、甘草总黄酮的方法，其特征在于：阴离子交换树脂色谱柱的上样流速为10—20 ml/min。