[发明专利]一种麦氏弧菌特异性引物及在检测水产养殖动物体内麦氏弧菌中的应用在审
申请号: | 201710094757.5 | 申请日: | 2017-02-22 |
公开(公告)号: | CN106868129A | 公开(公告)日: | 2017-06-20 |
发明(设计)人: | 刘宏生;张新刚;张力;艾海新 | 申请(专利权)人: | 辽宁大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12Q1/04 |
代理公司: | 沈阳杰克知识产权代理有限公司21207 | 代理人: | 金春华 |
地址: | 110000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 弧菌 特异性 引物 检测 水产 养殖 动物 体内 中的 应用 | ||
1.一种麦氏弧菌特异性引物,其特征在于:所述的麦氏弧菌特异性引物由上游引物F和下游引物R构成;
上游引物F的序列为:AACGATCTACTTGTTTCTCAGCC;
下游引物R的序列为:GCCTGTACGACGAATATCTAAGC。
2.根据权利要求1所述的一种麦氏弧菌特异性引物,其特征在于:所述的麦氏弧菌是Vibrio metschnikovii。
3.权利要求1或2所述的麦氏弧菌特异性引物在检测水产养殖动物体内麦氏弧菌中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,方法如下:
1)提取水产养殖动物组织的总DNA;
2)以所提取的DNA为模板,采用权利要求1或2所述的麦氏弧菌特异性引物,进行PCR扩增;
3)根据PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果判断水产养殖动物是否被麦氏弧菌感染。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:PCR扩增的反应体系和反应条件如下:
PCR反应条件:第一阶段:94℃5min;
第二阶段:94℃30s,59℃30s,72℃30s;30循环;
第三阶段:72℃5min;
第四阶段:4℃保存。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:步骤3)中,判断标准为,如果PCR扩增产物的琼脂糖凝胶呈像结果有354bp条带产生,则水产养殖动物被麦氏弧菌感染,否则没有被感染。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的水产养殖动物为大菱鲆、海参、泥鳅鱼、螃蟹、爬虾、青虾或三文鱼。
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