[发明专利]促进造血干细胞扩增并抑制其分化的化合物及细胞因子组合物

说明书

本发明涉及促进造血干细胞扩增并抑制其分化的组合物及细胞因子组合物。本发明揭示有利于维持体外培养的造血干细胞的干性的小分子化合物组合物，所述的组合物及适当的细胞因子在添加到造血干细胞基础培养基后，能够在体外高效扩增造血干细胞并抑制其分化，维持造血干细胞的干性。

技术领域

本发明属于生物医药领域；更具体地，本发明涉及造血干细胞体外扩增并抑制分化、维持造血干细胞特性稳定的新方法，以及促进造血干细胞扩增并抑制其分化的小分子化合物及细胞因子组合物。

背景技术

干细胞是一类具有自我更新及多向分化潜能的细胞群体。按干细胞的分化潜能的大小可以分为全能干细胞，多能干细胞和单能干细胞。造血干细胞是一类存在于骨髓中数量极其有限的细胞类群，具有自我更新和多向分化为各系血细胞的能力。造血干细胞移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性转移性肿瘤疾病的有效方法。其中，脐带血来源的造血干细胞移植具有无来源性限制、对HLA匹配要求不高、不易受病毒或肿瘤污染等优势，但由于其本身数量的限制以及供体资源的短缺，严重制约了脐带血造血干细胞的临床应用。

本发明人在先开发的技术中，尽管已经能够获得有效扩增的造血干细胞，但造血干细胞分化是其体外扩增中无法避免的一个问题，也是导致扩增后细胞丧失自我更新能力并制约其临床疗效的一大瓶颈。目前已知的造血干细胞体外扩增方法主要包括单纯细胞因子或其他生长因子刺激法、基质细胞共培养法、基因修饰法等。这些研究方案中，单纯细胞因子或其他生长因子法虽然能够达到可观的细胞数量，但是该法不利于维持干细胞的自我更新，因具有极高的分化率而影响后续的临床应用；基质细胞共培养法因引入了外源性细胞，易提高GVDH发生风险，不利于临床移植；基因修饰法涉及自身基因的改变或外源基因的插入，可能会干预细胞自身基因组稳定性，同时病毒载体的介入有可能提高致瘤风险。

综上，尽管截至目前有多种方法可以促进造血干细胞的体外扩增，但是如何有效抑制分化并维持干性稳定依然是需要进一步研究的。更特别地是，在考虑产业化的情形下，需要找到成本低廉，且可实现高效体外扩增、体外维持干性稳定的培养方法，从而有利于大规模实施、推广。

发明内容

本发明的目的在于提供促进造血干细胞扩增并抑制其分化的化合物及细胞因子组合物。

在本发明的第一方面，提供一种维持造血干细胞的干性的组合物，所述的组合物包括：

Stem Regenin 1： 0.2-10μM；

2-丙基戊酸： 0.05-2mM；

CAY10433： 0.02-1μM。

在另一优选例中，所述的用于维持造血干细胞的干性的组合物包括：

Stem Regenin 1： 0.5-5μM；

2-丙基戊酸： 0.08-1mM；

CAY10433： 0.04-0.5μM。

在本发明的另一方面，提供一种用于扩增造血干细胞并维持其干性的组合物，所述的组合物包括：

在一个优选例中，所述的用于扩增造血干细胞并维持其干性的组合物包括：

在另一优选例中，所述的用于扩增造血干细胞并维持其干性的组合物，所述的组合物还包括：白介素6：10-200ng/ml；较佳地为20-120ng/ml。