[发明专利]一种高效防治多种作物枯萎病的生防复合菌剂LAS

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效防治多种作物枯萎病的生防复合菌剂LAS，属于农业生物防治技术领域。

背景技术

西瓜、黄瓜、甜瓜和南瓜在全球范围内的农业作物产量中占有举足轻重的地位，其中枯萎病害是影响上诉4种农业作物产量和品质的主要病害之一。枯萎病是由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.)引起一种毁灭性的土传性病害，俗称萎凋病、死秧病等，在世界范围内均有发生。随着种植面积的扩大和连茬种植更加重了枯萎病的发生。

目前，枯萎病害防治主要的措施还是使用化学药剂。虽然化学药剂可以在一定程度上防治枯萎病，但是与此同时，土壤中许多有益的微生物也会受到不同程度的伤害。有些化学药剂的使用会造成土壤污染和化学农药残留等严重的问题。除此之外，选育抗病品种和加强田间管理措施对防治病害也有一定的作用。但是抗病品种的选育周期长，且枯萎病菌致病力变异大，抗性极易消失养。

农业措施中比较有效的是轮作倒茬，尤其是水旱轮作，能够有效的降低土壤中菌量，减少病害发生，但在实际应用中存在一定困难。一是西瓜、黄瓜、南瓜和甜瓜属于高经济值作物；二是由于枯萎菌菌能够在土壤中存活十几到几十年，短期轮作达不到预期目的；三是种植大多数非寄主植物不能减少微菌核在土壤中的数量，而且非寄主的根分泌物仍能为微菌核存活提供营养。

在这种发展情况下，不少目光开始转移到生物防治手段。生物防治与其他方法相比，具有安全、有效、持久的特点，特别是避免了化学防治带来的一系列问题。生防制剂对病害防治效果好，对人畜无毒，不污染环境，无残留；对病虫害的杀伤特异性强，不伤害天敌，有益生物，能保持生态平衡；生产原料和有效成分为天然产物易降解，可回归大自然，保证可持续发展；可用生物技术和基因工程的方法对微生物进行改；多种因素和成分发挥作用，病原菌难以产生抗药性。据报道，枯萎病的生防真菌主要有木霉菌、粘帚霉，但上述生防菌防治效果不够理想，主要原因是这些生防菌在寄主根际定殖能力差。枯萎病生防细菌中比较有前途的种类是芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞菌、芽孢杆菌等。一般说来，多种生防菌混合使用其效果比单一生防菌要好。另外，将生防菌剂和农业栽培措施结合起来使用，可为生防菌提供一个良好的栖境，使其能尽量发挥其本身的防治潜能。

发明内容

本发明目的是提供一种高效防治多种作物枯萎病的微生物组合物及由其制备的微生物复合菌剂。

本发明的另一目的是提供该微生物组合物及由其制备的微生物复合菌剂的应用。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：

一种高效防治多种作物枯萎病的微生物组合物，由以下3种细菌组成,分别是：芽胞杆菌JC65(Bacillus sp.)，于2010年12月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.4475；蜡状芽孢杆菌CH01(Bacillus cereuse),于2015年11月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.11677；枯草芽胞杆菌SM16为(Bacillus subtilis)，于2009年06月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.3127。

本发明所述的微生物组合物在防治枯萎病和促进作物生长方面的应用。

优选将所述的三种菌株JC65、CH01和SM16发酵后的湿菌与本实验室的菌体保藏液(属本实验室已授权专利，专利号ZL02112559.7，公开专利号CN1358838，公开日：2002年7月17日)按1：40(g/ml)配成菌剂，可室温保存2～3年。该复合菌剂可以稀释后于西瓜苗移栽时浇灌施用。

本发明所述的微生物组合物在制备防治枯萎病和促进作物生长的微生物复合菌剂中的应用。

本发明所述的微生物组合物制备的微生物复合菌剂。

本发明所述的微生物复合菌剂,优选通过以下方法制备得到：将所述的菌株JC65、CH01和SM16分别接种到LB平板上划线，28℃生化培养箱中培养14-16h，待长出单菌落后，挑取单菌落接入含有5mL的LB培养液的试管中，置于28℃，200r/min的摇床中培养，制成种子液；以1％的接种量将种子液接种于装有500mL的LB培养液的三角瓶里，置于28℃，200r/min的摇床中培养48h，将3种菌液浓度稀释到5×10⁷CFU/mL后按照1:1:1的比例混合均匀，即为所述的微生物复合菌剂。