[发明专利]一种阻断膝关节炎关节软骨损伤患者炎症因子的药物

说明书

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，涉及一种运用脐带间充质干细胞和超氧化物歧化酶以及维生素D复合药阻断膝关节炎关节软骨损伤患者炎症因子的新型药物。

背景技术

膝关节炎关节软骨损伤好发于中老年人和从事大负荷运动的人群，临床表现主要是两个方面：关节疼痛和运动功能障碍。目前，临床治疗效果不佳，主要是缓解患者的疼痛，改善膝关节功能，究其原因就是因为不清楚膝关节炎软骨损伤的发病机制。药物治疗主要是对症治疗，暂时缓解病人的痛苦，但长期效果不佳，症状容易反复发作。药物达到一定治疗效果的同时还伴随一些副作用。对于老年、晚期症状较重，保守治疗效果不佳的患者则需要进行人工膝关节置换术，不仅手术费用高，会给患者本人，家庭及社会造成严重负担，而且还需要进行二次手术。因此，脐带间充质干细胞和超氧化物歧化酶以及维生素D复合药用于治疗膝关节炎关节软骨损伤给膝关节患者带来新的希望。

脐带间充质干细胞具有更强的增殖分化能力，免疫原性低，取材方便，无道德伦理问题的限制，易于工业化制备。脐带间充质干细胞能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞，一旦注射入膝关节软骨损伤患者的膝关节可以定向分化为软骨细胞，促进机体损伤软骨的恢复。脐带间充质干细胞在膝关节软骨损伤修复方面具有长远的发展前景，可以治愈更多饱受病痛折磨的膝关节炎患者。

超氧化物歧化酶能够清除机体组织代谢过程中所产生的有害物质------过氧化物和氢氧根，这些代谢产物的堆积会造成机体组织出现损伤，软骨发生破坏以及组织不断纤维化。软骨损伤会引起机体的炎症反应，超氧化物歧化酶可将炎症过程中多形核吞噬细胞产生的花生四烯酸分解产物一过氧化物游离基转化为过氧化氢和氧，并加以清除，从而达到有效缓解乃至清除骨关节炎疼痛的目的。

维生素D是一种脂溶性维生素，也被看作是一种作用于钙、磷代谢的激素前体，能够保护关节结构性病变的展延和降低其临床症状。机体内缺乏维生素D会导致骨质疏松症进展、跌倒和骨折。

发明内容

本发明的目的是弥补现有药物治疗手段的不足之处，脐带间充质干细胞和超氧化物歧化酶以及维生素D复合药具有阻断膝关节炎关节软骨损伤患者炎症因子的活性，具有广泛的应用前景，可能成为临床上治疗膝关节炎的潜在治疗药物。

本发明的技术方案是：一种阻断膝关节炎关节软骨损伤患者炎症因子的药物，其特征在于：由以下组分组成，1X10⁶细胞/ml脐血源神经干细胞和20-60ng/ml环孢素A以及2-10 ng/ml 维生素B₁₂。

1X10⁷细胞/ml脐带间充质干细胞和10-25ng/ml超氧化物歧化酶以及5-15ng/ml 维生素D

本发明由以下组分组成，1X10⁷细胞/ml脐带间充质干细胞和15 ng/ml超氧化物歧化酶以及8 ng/ml 维生素D。

本发明由以下步骤组成，软骨细胞接种于含有10 %胎牛血清的DMEM培养基，置于37 ℃，5 ％ CO₂培养箱中悬浮培养。待软骨细胞生长到70-80 %，用复合药培养24 h即可。

DMEM培养基是 dulbecco's modified eagle medium的缩写；

DMEM的特性：

(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等;

(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍;

(3)含有糖酵解途径中的重要物质------丙酮酸;

(4)含有微量的铁离子。

膝关节炎关节软骨损伤患者在关节腔注射脐带间充质干细胞和超氧化物歧化酶以及维生素D复合药后，使用Lysholm膝关节功能评分进行评估药效，研究结果显示注射脐带间充质干细胞和超氧化物歧化酶以及维生素D复合药后可以明显改善膝关节炎关节软骨损伤患者的症状（表1）。