[发明专利]一种从妇女尿液中提取多种尿蛋白的方法有效
申请号: | 201710106475.2 | 申请日: | 2017-02-27 |
公开(公告)号: | CN106866812B | 公开(公告)日: | 2021-07-06 |
发明(设计)人: | 尤加宇;赵梦喆;许京堂;冷丽霞;路则喜;张海玉;赵贵吉;马锡峰 | 申请(专利权)人: | 日照岚山生化制品有限公司 |
主分类号: | C07K14/59 | 分类号: | C07K14/59;C12N9/72;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/14 |
代理公司: | 北京智桥联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11560 | 代理人: | 张晓煜 |
地址: | 276807 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 妇女 尿液 提取 多种 蛋白 方法 | ||
1.一种从妇女尿液中提取多种尿蛋白的方法,包括如下步骤:
(1)将尿液浓缩后调节pH至10-11;步骤(1)中调节pH通过加入氢氧化钠溶液进行;所述氢氧化钠溶液的质量浓度为10-40%;
(2)向步骤(1)所得溶液中加入硅藻土后过滤,所得硅藻土滤渣经处理得到较高纯度的尿激酶粗品;
(3)将步骤(2)过滤后的滤液调节pH至5-6,然后将促卵泡激素和黄体生成素进行沉淀,加入硅藻土处理后得到促卵泡激素和黄体生成素粗品;步骤(3)中所述调节通过加入冰醋酸进行;
步骤(1)中将尿液浓缩之前除去尿液中不溶性物质和可见杂质;步骤(1)中所述浓缩为浓缩至原体积的1/50-1/200;
步骤(2)中所述处理为将硅藻土滤渣溶解,经乙醇沉淀,脱水,干燥;
步骤(3)中将促卵泡激素和黄体生成素进行沉淀通过加入有机溶剂进行;
步骤(3)中加入硅藻土后搅拌、抽滤,再经脱水、干燥得到促卵泡激素和黄体生成素粗品。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述尿液为绝经妇女尿液。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(1)中将尿液经密闭过滤机预过滤除去其中不溶性物质和可见杂质。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述浓缩为浓缩至原体积的为1/100。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述浓缩为超滤浓缩,在超滤浓缩罐中进行。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(2)中加入硅藻土后搅拌,搅拌10分钟以上。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述有机溶剂为乙醇或/和丙酮。
8.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(3)中搅拌的时间为10分钟以上。
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