[发明专利]产环腺苷酸的酿酒酵母菌ZY1468及其应用有效

专利信息
申请号: 201710106765.7 申请日: 2017-02-27
公开(公告)号: CN106867919B 公开(公告)日: 2019-12-03
发明(设计)人: 李桂华;朱成杰;武彬;王宏勇;姬大庆;石天虹;阎佩佩;刘雪兰;魏祥法;刘涛 申请(专利权)人: 山东中裕建信生物技术有限公司
主分类号: C12N1/16 分类号: C12N1/16;C12P19/32;C12R1/865
代理公司: 37218 济南泉城专利商标事务所 代理人: 刘丽<国际申请>=<国际公布>=<进入国
地址: 250121 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 腺苷酸 酿酒 酵母菌 zy1468 及其 应用
【说明书】:

发明涉及微生物菌株技术领域,特别涉及一株产环腺苷酸的酿酒酵母菌ZY1468,其保藏编号为CGMCC.12859。还涉及所述产环腺苷酸的酿酒酵母菌ZY1468在产环腺苷酸中的应用。本申请的酿酒酵母菌ZY1468环腺苷酸具有高产性:发酵液的cAMP浓度>1%,即>10g/L,比传统酿酒酵母产量提高了7‑8倍;在发酵培养基中添加表面活性剂后,提高了酵母细胞的通透性,从而显著提升了cAMP产量,发酵培养基中:玉米粉、糖蜜、玉米蛋白粉、豆粕粉等原料的使用,替代葡萄糖、蛋白胨等原料,节省发酵培养基成本。

技术领域

本发明涉及微生物菌株技术领域,特别涉及一株产环腺苷酸的酿酒酵母菌ZY1468,还涉及所述产环腺苷酸的酿酒酵母菌ZY1468的应用。

背景技术

环腺苷酸(Cyclic adenosine monophosphate,简称为cAMP)是一种具有细胞内信息传递作用的小分子,被称为细胞内信使(intracellular messenger)或第二信使(secondmessengers)。以微量存在于动植物细胞和微生物中。体内多种激素作用于细胞时,可促使细胞生成此物,转而调节细胞的生理活动与物质代谢。cAMP能提高动物的生产性能和改善畜产品品质。其作用机理为:cAMP作为激素的第二信使激活蛋白激酶,使代谢酶活性增强,从而加强体内蛋白的合成,增快动物的生长速度;诱导激素(如生长激素等)或酶的合成,促进机体的合成代谢。

自1957年Sutherland首先在肝脏匀浆中发现cAMP之后,人们陆续在很多组织如肾、肺、肠、冠状动脉、支气管、脑垂体、血小板、乳汁、睾丸、骨髓等组织或体液中发现有cAMP存在。哺乳动物除红细胞外,所有组织中都有分布,通常在同类细胞中,cGMP比cAMP的水平低的多。正常情况下,细胞内的cAMP的浓度为0.1~1uM,但在激素或应激的作用下,可升高到一百倍以上。血浆中的cAMP比细胞中的低,约为10nM。胞内的cAMP可以释放入血,说明血浆cAMP的变化可在一定的程度上反映机体器官的生理变化。

《过程工程学报》第14卷第5期,2014年10 月中刊登的姬晓兵,王凯,陈洵发表的《过表达嘌呤合成途径关键酶基因对重组酿酒酵母菌株生产cAMP的影响》中研究了环磷酸腺苷(cAMP)合成途径中的 3 个关键酶基因(磷酸核糖焦磷酸合成酶基因 PRS1 和 PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因 ADE4、腺苷酸激酶基因 ADK1)过量表达对重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)发酵向胞外分泌 cAMP 的影响,利用酿酒酵母游离型质粒YEplac195 和磷酸甘油酸激酶 PGK 的强启动子 PGK1p 及终止子PGK1t 构建含 PRS1,PRS3, ADE4 和 ADK1 的单基因表达载体,分别转入 cAMP 生产菌 GA125,通过摇瓶发酵实验考察重组菌株与对照菌株的生长、 cAMP 生产及胞外腺嘌呤消耗情况. 结果表明,在外加腺嘌呤条件下,基因 PRS1, PRS3, ADE4 和 ADK1分别单独过表达菌株 GAP125-1,GAP125-3, GAE125 和GAK125 的胞外 cAMP 最大产量分别为 5197.6, 5440.0,5291.8 和4797.6 μmol/L,比出发菌株 GA125 的胞外cAMP 最大产量 4989.6 μmol/L 分别提高4.17%, 9.03%,6.06%和降低 3.85%。

但上述记载中,cAMP的产量仍然不是很高,因此,研究一种高产环腺苷酸的酿酒酵母菌株,成为一个迫切解决cAMP的产量的问题,将大大降低环腺苷酸的生产成本和工艺操作,促进环腺苷酸的更广泛使用。

发明内容

为了解决以上现有技术中重组酿酒酵母菌株产环腺苷酸产量低的问题,本申请提供了一株高产环腺苷酸的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)ZY1468。

本申请还提供了所述酿酒酵母菌ZY1468在产环腺苷酸中的应用。

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