[发明专利]一种荧光蛋白、融合蛋白、分离的核酸、载体和应用

说明书

本发明公开了一种荧光蛋白、融合蛋白、分离的核酸、载体和应用，涉及生物医学光学与分子影像学技术领域。本发明公开的荧光蛋白相对于现有的荧光蛋白mCrimson包括由氨基酸突变位点C158D。该突变位点使得本发明的荧光蛋白的荧光光谱性质发生了改变，具有较大的斯托克斯位移特性，可用于单光子或多光子显微多色成像中，能有效地减少不同荧光蛋白的荧光光谱相互之间的串扰，提高成像的灵敏度，保证不同光谱的荧光蛋白可被同时荧光成像，降低对光学器件的高要求。

技术领域

本发明涉及生物医学光学与分子影像学技术技术领域，具体而言，涉及一种荧光蛋白、融合蛋白、分离的核酸、载体和应用。

背景技术

在使用荧光蛋白进行活体成像时，往往难以实现多通道同时成像，若能突破这一限制，则可实现对多个生物快速反应事件的检测，将极大推动神经科学的发展。

在单光子成像中，可采用由不同激发波长的光激发多种荧光蛋白来实现多通道同时成像。然而，在多光子成像中，添加一个二级钛蓝宝石雷射或光学参数振荡器的费用较高，并且难以将它们调控到一起，因此，多种荧光蛋白同时成像较难实现。

目前同时成像多个生物分子事件的显微镜方法主要依赖对激光的动态调制，需要多套重复的光学器件，成本昂贵，并且难以实现精确的同步控制。

斯托克斯位移指的是荧光物质的最大发射波长和最大激发波长之差。该差值若大于100nm，则认为该荧光蛋白具有大斯托克斯位移的特性。

开发出大斯托克斯位移(激发峰与发射峰之间的距离)的荧光蛋白可有效的解决这一问题，实现同一激发波长的光同时激发两种荧光蛋白，然后发射出不同波长区域的光，达到两种荧光蛋白多光子同时成像的目的。并能和常用的绿色荧光蛋白结合在一起使用，将使两种不同的生物反应事件可视化，大大降低对光学器件的高要求。大斯托克斯位移的荧光蛋白在多色双光子成像时，可保证两个不同光谱的荧光蛋白被同时荧光成像，并且有效地减少荧光光谱的串扰。

发明内容

本发明的目的在于提供一种荧光蛋白，该荧光蛋具有较大的斯托克斯位移特性，其是一种新的大斯托克斯位移荧光蛋白，其可与现有的荧光蛋白结合在一起，用于单光子或多光子显微多色成像中，避免多个荧光蛋白分子之间的荧光光谱的串扰，实现多种荧光蛋白同时成像的效果，降低对光学器件的高要求。

本发明的再一目的在于提供一种融合蛋白，该融合蛋白含有上述的荧光蛋白。

本发明的另一目的在于提供一种分离的核酸，用于编码上述的荧光蛋白。

本发明的另一目的在于提供一种载体，其含有上述的核酸。

本发明的另一目的在于提供含有上述载体的重组细胞。

本发明的另一目的在于提供上述的荧光蛋白在活体成像中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种生物发光共振能量转移系统，该生物发光共振能量转移系统的成像效果好，各荧光分子间不发生荧光光谱的干扰。

本发明是这样实现的：

一种荧光蛋白，其相对于荧光蛋白mCrimson包括以下氨基酸突变位点：C158D。

一种融合蛋白，其含有上述的荧光蛋白。

一种分离的核酸，其编码上述的荧光蛋白。

一种载体，其含有上述的核酸。

含有上述载体的重组细胞。

上述的荧光蛋白荧光蛋白在单光子或多光子显微多色成像中的应用。

一种生物发光共振能量转移系统，以上述的荧光蛋白为所述生物发光共振能量转移系统的供体或者受体。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：