[发明专利]一种烟草花叶病毒衣壳蛋白胶囊的制备方法

权利要求书

1.一种烟草花叶病毒衣壳蛋白胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液的制备：

在烟草花叶病毒溶液中加入乙酸，混匀后静置，离心去除RNA沉淀；将上清液过脱盐柱分离，去除乙酸，将所得到的溶液在去离子水中透析12-24h，离心，将所得的沉淀用磷酸缓冲溶液复溶，得到烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液；

2)烟草花叶病毒衣壳蛋白乳液的制备：

在烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液中，加入油相，充分混合，得到烟草花叶病毒衣壳蛋白乳液；

3)烟草花叶病毒衣壳蛋白胶囊的制备：

在烟草花叶病毒衣壳蛋白乳液中滴加稀盐酸调节酸碱度，之后在体系中加入交联剂，在4℃的条件下反应6h使烟草花叶病毒衣壳蛋白在油水界面处交联得到烟草花叶病毒衣壳蛋白胶囊；

其中，步骤1)中，所述烟草花叶病毒溶液的浓度为5-20mg/ml，与乙酸的体积比为1:2；

步骤2)中，所述油相为全氟萘烷，油水相的比例控制在1:8-1:12；

步骤3)中，所述酸碱度被调节至5.3-5.7；

步骤3)中，所述交联剂为戊二醛，体系中戊二醛的终浓度为2-3％。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述混匀后静置的时间为30-40min。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1)中，所述磷酸缓冲溶液为20-200mM的pH＝8.0的磷酸缓冲溶液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述磷酸缓冲溶液为100mM的pH＝8.0的磷酸缓冲溶液。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1)中，所述离心为在4℃条件下以8000-10000rpm离心8-12min。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2)中，所述烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液为含有20mM pH＝8.0的磷酸缓冲溶液的浓度为0.1-1mg/ml的烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液为含有20mM pH＝8.0的磷酸缓冲溶液的浓度为0.5mg/ml的烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3)中，体系中戊二醛的终浓度为2.5％。