[发明专利]一种氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱及制备方法

权利要求书

1.一种氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱，其特征在于：所述的整体柱先以环氧基聚倍半硅氧烷与多胺试剂开环加成聚合，形成具有高度交联三维结构的杂化硅胶整体柱基质固定相，在此基础上，柱后衍生键合氨基寡糖制得；所述的整体柱基质固定相表面键合带正电荷阳离子的碱性氨基寡糖。

2.根据权利要求1所述的一种氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱，其特征在于：所述的氨基寡糖在笼型聚倍半硅氧烷立体分布的环氧基开环加成产物上缩合偶联，所制得的整体柱具有n=8的聚倍半硅氧烷（-SiO_3/2）n笼型结构、碱性氨基-NH₂/胺基-NH-CH₂-基团和极性羟基基团-OH；所述的氨基寡糖为高水溶性带正电荷阳离子的氨基寡糖素。

3.根据权利要求1所述的一种氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱，其特征在于，按质量百分数之和为100%计，所述整体柱基质固定相，其原料中各组分占组成总质量的百分比为：环氧基聚倍半硅氧烷试剂13.40%，多胺试剂 11.60%，致孔剂由三元体系组成，其中一元醇致孔剂57.75%~58.50%，二元醇致孔剂10.50%~10.88%，醇聚合物致孔剂6.00%~6.75%。

4.根据权利要求3所述的一种氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱，其特征在于，

所述的环氧基聚倍半硅氧烷试剂为八环氧基笼型倍半硅氧烷；

所述的多胺试剂为聚乙烯亚胺1200；

所述的一元醇致孔剂为正丙醇，二元醇致孔剂为1,4-丁二醇，醇聚合物致孔剂为聚乙二醇10000。

5.根据权利要求2所述的一种氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱，其特征在于，所述氨基寡糖素原料为质量分数为0.30%-1.00%的氨基寡糖素溶液；所述的氨基寡糖素溶液的溶剂为0.1% 醋酸溶液。

6.一种制备如权利要求1所述的氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）毛细管柱壁表面氨基化：

对毛细管空柱依次采用0.1mol/L的盐酸溶液、1.0 mol/L的NaOH溶液冲洗3小时，去离子水冲洗15分钟、甲醇冲洗15分钟，在50℃下氮气吹干；注入甲醇与氨丙基三甲氧基硅烷体积比为1∶1的混合物，在60℃下反应12小时，用甲醇冲洗15分钟；在70℃下氮气吹干，制得柱壁表面氨基化的毛细管；

（2）环氧基聚倍半硅氧烷与多胺试剂开环聚合：

按比例称取环氧基聚倍半硅氧烷试剂、多胺试剂、致孔剂，混合均匀，超声振荡15分钟，然后将混合物注入步骤（1）制得的柱壁表面氨基化的毛细管中，控制注入的液柱的长度为28~32厘米，两端封闭并浸于50℃水浴锅中恒温加热16小时；待反应完成后，以甲醇为流动相，在液相色谱泵上冲洗毛细管柱1小时，冲去床层内残留的混合物、再将毛细管柱在泵压12MPa状态下平衡10~15 h，制得以环氧基聚倍半硅氧烷与多胺试剂开环聚合的杂化硅胶整体柱基质固定相；

（3）碱性氨基低聚糖柱后修饰：

将醛溶液用液相泵通入步骤（2）制得的以环氧基聚倍半硅氧烷与多胺试剂开环聚合的整体柱基质固定相，60℃恒温反应1小时；将氨基寡糖素溶液注入醛基反应后的毛细管柱内60℃恒温反应3小时，使管壁表面上醛基与寡糖分子侧链的氨基发生缩合反应；反应后用水冲洗，除去残留的醛试剂，即制得表面键合碱性氨基寡糖的杂化硅胶整体柱。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤（3）所述的醛溶液是采用pH=8.00、浓度为50 mmol/L 磷酸盐缓冲液配制的10%戊二醛溶液。