[发明专利]莱菔硫烷在制备治疗白血病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及莱菔硫烷的新用途技术领域，具体涉及莱菔硫烷在治疗白血病药物中的应用。

背景技术

莱菔硫烷（Sulforaphane，SFN）是一种存在于西兰花和其它十字花科蔬菜中的异硫氰酸盐物质，具有抗增殖能力，目前研究发现SFN对卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤细胞的生长具有抑制作用，是一种新型的抗癌成分。但是，SFN对造血肿瘤细胞的作用及机制则报道较少。

细胞周期失控是引起恶性增殖性疾病的重要原因之一。急性白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病，白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其它造血组织中大量增殖，并浸润其它组织和器官，同时正常造血受抑制。Bcl-2基因家族是与细胞凋亡紧密相关的家族，其中Bcl-2和Bax分属Bcl-2家族中的抑制凋亡和促进凋亡的两部分，Bcl-2发挥保护细胞的作用，减少细胞凋亡，而Bax则发挥诱导细胞凋亡的作用，两者在细胞内的表达维持在平衡状态，形成一个凋亡调节系统，共同调控细胞增殖和凋亡。当Bax过度表达时形成Bax-Bax同源二聚体，促进细胞凋亡；随着Bcl-2表达量上升，Bax同源二聚体便分开，Bcl-2与Bax可以形成比Bax-Bax更稳定的Bax-Bcl-2二聚体，则抑制细胞的凋亡。因此，Bax/Bcl-2两蛋白之间的比例关系是决定对细胞凋亡抑制作用强弱以及恶性肿瘤预后的关键因素。含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解（Caspase），Caspase是一组存在于细胞质中具有类似结构的蛋白酶。Caspase与真核细胞凋亡密切相关，并参与细胞的生长、分化与凋亡调节，也是细胞凋亡通路的重要组成部分。其中，Caspase-3被认为是一个涉及在不同的细胞系凋亡执行最常见的成员，这些蛋白质控制线粒体外膜通透性（MOMP）和线粒体膜间隙蛋白如细胞色素C的释放。

在各类成人白血病中，以急性髓系白血病（Acute myeloid leukaemia，AML）发病率最高，且化疗缓解率较低。KGla细胞和K562细胞是分别来源于急性髓系白血病耐药的细胞株和慢性白血病急性变的患者中分离建立的细胞株，是目前研究急性髓系白血病的理想模型，本发明以不同浓度的SFN作用KG1a细胞和K562细胞，观察其对白血病细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响，分析SFN抑制白血病细胞增殖的作用和机制。

发明内容

本发明的目的在于提供莱菔硫烷的新用途，即莱菔硫烷在制备治疗白血病药物中的新应用。

实际上，本发明涉及莱菔硫烷在制备治疗白血病药物中的新应用，即莱菔硫烷通过调控细胞凋亡抑制白血病细胞的增殖。

具体的，本发明涉及莱菔硫烷在制备治疗白血病药物中的新应用，即莱菔硫烷通过调控Bax基因、Bcl-2基因和Caspase-3基因诱导白血病细胞凋亡进而抑制白血病细胞的增殖。

本发明所涉及莱菔硫烷在制备治疗白血病药物中的新应用，即莱菔硫烷通过上调Bax基因和Caspase-3基因及下调Bcl-2基因促进白血病细胞凋亡进而抑制白血病细胞的增殖。

进一步限定，所述的白血病细胞为KG1a细胞和K562细胞。

本发明首次系统探讨了SFN对急性白血病细胞KG1a和K562细胞凋亡的影响，结果证明SFN可以通过调控Bax基因、Bcl-2基因和caspase-3基因促进急性白血病细胞凋亡，这不仅是理论上的突破，而且具有潜在的临床意义，为治疗白血病提供了一种全新的思路和潜在的治疗路径。

附图说明

图1是SFN对KGla细胞和K562细胞增殖活力的影响图，CCK8检测和显微镜观察显示不同浓度的SFN（0、4、8、12μmol/L）作用于KGla细胞和K562细胞后，细胞增殖活力随着细胞浓度和作用时间延长而降低；

图2是流式细胞仪检测SFN对KGla细胞和K562细胞凋亡的影响图，结果显示不同浓度的SFN（0、4、8、12μmol/L）作用KGla细胞48h的早期凋亡率分别为0、3.12%、13.33%、28.18%，不同浓度的SFN（0、4、8、12μmol/L）作用K562细胞48h的早期凋亡率分别为0、2.81%、10.68%、30.27%；

图3是Western blotting检测SFN对白血病细胞中Bax基因、Bcl-2基因和Caspase-3基因蛋白表达的影响图；

图4是RT-PCR检测SFN在白血病细胞中对凋亡基因Bax、Bcl-2和Caspase-3的影响图。

具体实施方式