[发明专利]一种利用荧光光谱监控酶法制备降血糖肽的方法有效
申请号: | 201710110357.9 | 申请日: | 2017-02-27 |
公开(公告)号: | CN106996925B | 公开(公告)日: | 2020-06-16 |
发明(设计)人: | 颜辉;余永建;朱胜虎;贾俊强;熊孟;江明珠;吴琼英 | 申请(专利权)人: | 江苏科技大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 黄天天 |
地址: | 210000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 荧光 光谱 监控 法制 血糖 方法 | ||
1.一种利用荧光光谱监控酶法生产降血糖肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)采集不同时间下酶解反应液的荧光光谱,其中,所述的酶解反应液为牡丹籽蛋白酶解液或麦胚蛋白酶解液;
使用荧光光谱仪获得酶解反应液的荧光光谱,设置激发波长280nm,发射波长300~500nm,在酶解反应的0~60min内选取若干时间节点对酶解反应液进行荧光光谱扫描;
(2)获取荧光光谱的峰位:
采用二次一阶多项式的1阶导数法方法,宽度为5~21点,计算出导数值为0时的波长值,即为荧光光谱的峰位;
(3)建立荧光光谱峰位与酶解反应液对α葡萄糖苷酶活性的抑制率的关系:根据方程Y=ax2+bx+c对数据进行拟合,获得参数a、b、c,其中Y是对α葡萄糖苷酶活性的抑制率,x是荧光光谱的峰位;
(4)蛋白酶解液对α葡萄糖苷酶抑制率的实时监控:
在酶解过程中,对酶解反应液进行荧光光谱扫描,获得荧光光谱,根据步骤(2)中的方法获得荧光光谱的峰位x,将峰位x代入步骤(3)所获的方程,计算得到酶解产物对α葡萄糖苷酶活性的抑制率。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,在酶解反应的0~60min内选取3~15个节点。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,当所述酶解反应液为牡丹籽蛋白酶解液时,步骤(1)中分别在酶解0、3、6、9、12、15、20、30、45、60 min时对酶解反应液进行荧光光谱扫描;当所述酶解反应液为麦胚蛋白酶解液时,步骤(1)中分别在酶解0、2.5、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、25、30、40、50 min时对酶解反应液进行荧光光谱扫描。
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